[發明專利]一種天然中蜂荔枝蜜和天然意蜂荔枝蜜指紋圖譜的構建方法及鑒別應用

有效

• 申請號: 201811142030.0
• 申請日: 2018-09-28
• 公開（公告）號: CN109470779B
• 公開（公告）日: 2021-11-23
• 發明（設計）人: 王華堂;趙紅霞;黃文忠;朱穎茵;張學鋒
• 申請（專利權）人: 廣東省科學院動物研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 胡素麗;劉明星

本發明公開了一種天然中蜂荔枝蜜和天然意蜂荔枝蜜指紋圖譜的構建方法及鑒別應用。本發明通過采用頂空固相微萃取?氣相色譜?質譜聯用的方法和中藥指紋圖譜相似度評價系統分別構建得到天然中蜂荔枝蜜和天然意蜂荔枝蜜的GC/MS指紋圖譜；確定天然中蜂荔枝蜜的GC/MS指紋圖譜中含有19種共有特征揮發性成分，天然意蜂荔枝蜜的GC/MS指紋圖譜中含有16種共有特征揮發性成分。通過比對待測天然荔枝蜜樣品總離子色譜圖與已構建GC/MS指紋圖譜的相似度和化學組成差異，從而準確區分鑒別天然中蜂荔枝蜜和天然意蜂荔枝蜜。本發明的方法具有樣品用量小、特征性強、結果可靠的特點，十分有益于解決當前市場上存在中意蜂荔枝蜜難以辨別的問題，具有非常明顯的社會效益。

技術領域：

本發明屬于蜂蜜區分檢測領域，具體涉及一種天然中蜂荔枝蜜和天然意蜂荔枝蜜指紋圖譜的構建方法及鑒別應用。

背景技術：

蜜源植物花蜜的揮發物是蜂蜜香味物質的重要來源，不同蜜源植物來源的蜂蜜或添加了不同物質的假蜂蜜常含有不同的揮發性成分(Vilma et al.,2008；任佳淼等，2016)。蜂蜜的揮發性成分色譜指紋圖譜(Chromatographic fingerprint)是指能夠鑒別不同蜜源植物或不同地區來源蜂蜜樣本間差異的色譜圖譜(Konstantinosa et al.,2010；Jasicka-Misiak et al.,2018)。這種色譜圖譜多態性豐富，且具有高度的蜂蜜品種特異性和地區穩定性的特點。對于單花蜜而言，由于同種蜜源植物具有整體的遺傳相似性，因此利用蜂蜜的揮發性成分色譜指紋圖譜可進行準確鑒別(Soares et al.,2017)。如夏立婭等(2010)利用頂空固相微萃取-氣相色譜-質譜聯用法建立了由14個共有峰組成的棗花蜂蜜揮發性成分指紋圖譜。涂世等(2011)則采用超聲波輔助萃取法，并結合氣相-氫火焰化離子檢測和氣相色譜-質譜聯用技術建立了油菜單花蜜的揮發性成分指紋圖譜。

天然荔枝蜜，是我國南方地區生產的上等蜂蜜，為我國單花蜜中的特色品種，因其具有特殊的生津、益血和理氣等功效而深受消費者的偏愛。然而，由于當前天然荔枝蜜標準化的質量控制指標的缺乏，導致市場上依然存在諸多劣質或摻假蜜；且同時由于國內市場上天然中華蜜蜂(Apis cerana cerana，中蜂)蜂蜜的價格是天然意大利蜜蜂(A.melliferaligustica，意蜂)蜂蜜的3-5倍，在利益驅使下，市場上亦常出現使用天然意蜂荔枝蜜摻入或冒充天然中蜂荔枝蜜的現象，給中蜂的養殖者及其相關蜂產品的加工企業帶來了較大損失，也容易引發消費者的信任危機(胡福良等，2016)。目前，國內外尚無有關天然中意蜂荔枝蜜GC/MS指紋圖譜的相關報道，對天然中意蜂荔枝蜜的區分主要停留在消費者或蜂農的人為主觀區分，這些方法主要依靠經驗、主觀性大，無法對天然中蜂荔枝蜜和天然意蜂荔枝蜜進行科學鑒別。因此，生產上亟需一種科學的方法來區分鑒別這兩種荔枝蜜，以在一定程度上遏制市場上以低價天然意蜂荔枝蜜冒充或摻入高價天然中蜂荔枝蜜的亂象。

發明內容：

本發明的目的是為了提供一種天然中蜂荔枝蜜和天然意蜂荔枝蜜指紋圖譜的構建方法及鑒別應用。

本發明的第一個目的是提供一種天然中蜂荔枝蜜和天然意蜂荔枝蜜指紋圖譜的構建方法，包括以下步驟：通過采用頂空固相微萃取-氣相色譜-質譜聯用的方法和中藥指紋圖譜相似度評價系統分別構建得到天然中蜂荔枝蜜和天然意蜂荔枝蜜的GC/MS指紋圖譜；對指紋圖譜中各色譜峰對應的質譜圖進行多點校正和峰匹配分析，確定天然中蜂荔枝蜜的GC/MS指紋圖譜中含有19種共有特征揮發性成分，天然意蜂荔枝蜜的GC/MS指紋圖譜中含有16種共有特征揮發性成分。