[發明專利]一種重組腺病毒的表達載體SAd23-L在審
| 申請號： | 201811139300.2 | 申請日： | 2018-09-28 |
| 公開（公告）號： | CN109797168A | 公開（公告）日： | 2019-05-24 |
| 發明（設計）人： | 羅升學;劉博超;馬曉瑞;張攀麗 | 申請（專利權）人： | 廣州佰芮慷生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/861 | 分類號： | C12N15/861;A61K39/12;A61P31/14 |
| 代理公司： | 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102 | 代理人： | 廖苑濱;許青華 |
| 地址： | 510515 廣東省廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 編碼區 構建 重組腺病毒 表達載體 分子克隆 重組病毒 腺病毒 刪除 腺病毒表達載體 復制缺陷性 腺病毒載體 大片 酶切位點 細菌水平 陽性克隆 基因組 胚細胞 人血清 野生型 滴度 人源 質粒 成功率 替換 克隆 篩選 | ||
1.一種重組腺病毒表達載體，其特征在于，以野生型腺病毒SAd23的全基因組為基礎，通過直接克隆方法，刪除E1編碼區和E3編碼區，在E1刪除區插入I-Ceu I和PI-Sce I酶切位點，同時以腺病毒人血清型5型（Ad5）的E4編碼區替換SAd23的E4編碼區，獲得復制缺陷型的重組腺病毒表達載體。
2.如權利要求1所述的表達載體，其特征在于，所述的刪除E1編碼區是指刪除野生型腺病毒SAd23的基因組中第492-3022位的堿基序列。
3.如權利要求1所述的表達載體，其特征在于，所述的刪除E3編碼區是指刪除野生型腺病毒SAd23的基因組中第27895-31909位的堿基序列。
4.如權利要求1所述的表達載體，其特征在于，所述的SAd23的E4編碼區是指野生型腺病毒SAd23的基因組中第33841-36181位的堿基序列。
5.如權利要求1所述的表達載體，其特征在于，所述的Ad5的E4編碼區是指人血清型腺病毒Ad5基因組中第33193-35526位的堿基序列。
6.如權利要求1所述的表達載體，其特征在于，表達載體的酶切位點I-Ceu I和PI-SceI之間，還包括外源的抗原基因。
7.如權利要求6所述的表達載體，其特征在于，所述的外源抗原是寨卡病毒的包膜蛋白抗原。
8.如權利要求1所述的重組腺病毒表達載體，其特征在于，所述重組腺病毒表達載體的核苷酸序列如SEQ ID NO: 5所示。
9.一種制備疫苗的方法，其特征在于，所述方法包括：
S1.提供權利要求1所述的重組腺病毒表達載體；
S2.將外源的抗原編碼基因插入到S1表達載體的酶切位點I-Ceu I和PI-Sce I之間；
S3.將S2的重組表達載體轉染細胞，病毒在細胞內包裝，從而獲得具有免疫原性的疫苗。
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