[發(fā)明專利]一種三維液相色譜蛋白純化裝置及其使用方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811137039.2
• 申請日: 2018-09-28
• 公開（公告）號: CN109030686B
• 公開（公告）日: 2020-06-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 李篤信;易琳;朱夢;張真慶;邱飄飄;閆娜
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州大學(xué)
• 主分類號: G01N30/20
• 分類號: G01N30/20
• 代理公司: 蘇州翔遠(yuǎn)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 32251
• 代理人: 陸金星

本發(fā)明提供一種三維液相色譜蛋白純化裝置及其使用方法，包括三套輸液泵系統(tǒng)、三支色譜柱、兩個切換閥。本發(fā)明將三種不同保留機制色譜柱在線聯(lián)用，通過對切換閥的控制，使目標(biāo)蛋白質(zhì)選擇性通過三支色譜柱逐級純化，從而制備高純度蛋白質(zhì)。本發(fā)明集三種保留機制色譜柱于一體，可以連續(xù)操作，自動化程度高，重現(xiàn)性好。實現(xiàn)一次進樣，一步到位純化出高純度目標(biāo)蛋白質(zhì)。相對傳統(tǒng)的離線分離模式，既避免了樣品分次分別收集、富集、再進樣等處理過程中的損失，又降低了樣品在處理過程中變性、被污染等風(fēng)險，還大大節(jié)省了分步處理的時間及人工成本。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥純化裝置領(lǐng)域，具體涉及一種三維液相色譜蛋白純化裝置及其使用方法。

背景技術(shù)

基因工程藥物、單克隆抗體、重組疫苗等藥物本質(zhì)上均為蛋白質(zhì)，生物藥相對傳統(tǒng)小分子藥，具有活性強、特異性強、生物功能明確等優(yōu)點。蛋白提取過程難以控制，提純產(chǎn)量低是生物藥開發(fā)的瓶頸。據(jù)報道，生物藥下游工藝成本占藥物生產(chǎn)成本的80％，可見純化工藝對生物藥的推廣影響重大。近年來，生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)迅猛發(fā)展，蛋白純化技術(shù)的瓶頸也日益凸顯。生物藥作為一類大分子提取物，其免疫原性較小分子化合物更為明顯，因此生物藥的純度直接關(guān)聯(lián)其品質(zhì)，而目前對生物藥精制最好的手段是色譜法。利用凝膠過濾、離子交換色譜、吸附色譜、親和色譜等對蛋白進行多重的分離純化，可精制出高純度的蛋白藥物。但色譜分離方法耗時較長；產(chǎn)量較低；多種保留機制色譜的使用，需要對樣品進行多次富集、進樣操作，樣品損失大；純化過程自動化程度低；工作量大。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種三維液相色譜蛋白純化裝置及其使用方法，來解決目前蛋白色譜純化過程中，多重離線純化工藝繁瑣、耗時耗力等問題。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種三維液相色譜蛋白純化裝置，包括：第一切換閥、第二切換閥、第一色譜柱、第二色譜柱、第三色譜柱、第一泵系統(tǒng)、第二泵系統(tǒng)、第三泵系統(tǒng)、廢液池和餾分池，

所述第一泵系統(tǒng)的出口端通過管路連接第一色譜柱的進口端，所述第一切換閥的1號位通過管路與所述第一色譜柱的出口端連接，2號位通過管路與所述第二色譜柱的進口端連接，3號位通過管路與所述第二泵系統(tǒng)的出口端連接，4號位通過管路與所述第二切換閥的1號位連接，5號位通過管路與所述第二色譜柱的出口端連接，6號位通過管路與所述廢液池的進口端連接，

所述第二切換閥的1號位通過管路與所述第一切換閥的4號位連接，2號位通過管路與所述第三色譜柱的進口端連接，3號位通過管路與所述第三泵系統(tǒng)的出口端連接，4號位通過管路與所述廢液池的進口端或所述餾分池的進口端連接，5號位通過管路與所述第三色譜柱的出口端連接，6號位通過管路與所述廢液池的進口端連接。

作為本發(fā)明所述一種三維液相色譜蛋白純化裝置的一種優(yōu)選方案，所述三維液相色譜蛋白純化裝置還包括第三切換閥，所述第三切換閥設(shè)置在與所述第二切換閥的4號位連接的管路上，通過所述第三切換閥控制液體流向所述廢液池的進口端或所述餾分池的進口端。

作為本發(fā)明所述一種三維液相色譜蛋白純化裝置的一種優(yōu)選方案，所述第一切換閥和第二切換閥為六通閥、八通閥或十通閥中的任意一種。

作為本發(fā)明所述一種三維液相色譜蛋白純化裝置的一種優(yōu)選方案，所述第一色譜柱、第二色譜柱和第三色譜柱的基質(zhì)材料為硅膠、葡聚糖、瓊脂糖或聚甲基丙烯酸甲酯中的任意一種。

作為本發(fā)明所述一種三維液相色譜蛋白純化裝置的一種優(yōu)選方案，所述第一色譜柱、第二色譜柱和第三色譜柱為疏水相互作用色譜柱、離子交換色譜柱或體積排阻色譜柱中的任意一種。

作為本發(fā)明所述一種三維液相色譜蛋白純化裝置的一種優(yōu)選方案，所述疏水相互作用色譜柱的鍵合相為C18、C8、C4、苯基中的任意一種。

作為本發(fā)明所述一種三維液相色譜蛋白純化裝置的一種優(yōu)選方案，所述離子交換色譜柱為強陽離子交換色譜柱、強陰離子交換色譜柱、弱陽離子交換色譜柱或弱陰離子交換色譜柱中的任意一種。