[發(fā)明專利]一種三維液相色譜蛋白純化裝置及其使用方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811137039.2
• 申請日: 2018-09-28
• 公開（公告）號: CN109030686B
• 公開（公告）日: 2020-06-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李篤信;易琳;朱夢;張真慶;邱飄飄;閆娜
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州大學(xué)
• 主分類號: G01N30/20
• 分類號: G01N30/20
• 代理公司: 蘇州翔遠(yuǎn)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 32251
• 代理人: 陸金星

1.一種三維液相色譜蛋白純化裝置，其特征是，包括：第一切換閥、第二切換閥、第一色譜柱、第二色譜柱、第三色譜柱、第一泵系統(tǒng)、第二泵系統(tǒng)、第三泵系統(tǒng)、廢液池和餾分池，

所述第一泵系統(tǒng)的出口端通過管路連接第一色譜柱的進(jìn)口端，所述第一切換閥的1號位通過管路與所述第一色譜柱的出口端連接，2號位通過管路與所述第二色譜柱的進(jìn)口端連接，3號位通過管路與所述第二泵系統(tǒng)的出口端連接，4號位通過管路與所述第二切換閥的1號位連接，5號位通過管路與所述第二色譜柱的出口端連接，6號位通過管路與所述廢液池的進(jìn)口端連接，

所述第二切換閥的1號位通過管路與所述第一切換閥的4號位連接，2號位通過管路與所述第三色譜柱的進(jìn)口端連接，3號位通過管路與所述第三泵系統(tǒng)的出口端連接，4號位通過管路與所述廢液池的進(jìn)口端或所述餾分池的進(jìn)口端連接，5號位通過管路與所述第三色譜柱的出口端連接，6號位通過管路與所述廢液池的進(jìn)口端連接，

所述三維液相色譜蛋白純化裝置還包括第三切換閥，所述第三切換閥設(shè)置在與所述第二切換閥的4號位連接的管路上，通過所述第三切換閥控制液體流向所述廢液池的進(jìn)口端或所述餾分池的進(jìn)口端，

其使用方法，包括步驟：

(1)當(dāng)?shù)谝磺袚Q閥的1號位與6號位連通、2號位與3號位連通、4號位與5號位連通時，第一切換閥處于A位置，當(dāng)?shù)诙袚Q閥的1號位與6號位連通、2號位與3號位連通、4號位與5號位連通時，第二切換閥處于A位置，設(shè)置第一切換閥處于A位置，第二切換閥處于A位置，第一色譜柱處于上樣狀態(tài)，第二色譜柱和第三色譜柱處于柱平衡狀態(tài)，第一泵系統(tǒng)輸送液體經(jīng)第一色譜柱入第一切換閥的1號位，經(jīng)6號位直接流入廢液池；

(2)設(shè)置第一切換閥處于A位置，第二切換閥處于A位置，第一色譜柱處于除前雜狀態(tài)，第二色譜柱和第三色譜柱處于柱平衡狀態(tài)，維持此狀態(tài)直至第一色譜柱上的前雜蛋白洗脫完畢；

(3)當(dāng)?shù)谝磺袚Q閥的1號位與2號位連通、3號位與4號位連通、5號位與6號位連通時，第一切換閥處于B位置,設(shè)置第一切換閥處于B位置，第二切換閥處于A位置,第一色譜柱處于洗脫狀態(tài)，第二色譜柱處于富集狀態(tài)，第三色譜柱處于平衡狀態(tài)，當(dāng)?shù)谝槐孟到y(tǒng)輸出的液體濃度逐漸降低，第一色譜柱上目的蛋白開始洗脫出來，第一切換閥置于位置B，第一色譜柱與第一切換閥的1號位相連，流動相經(jīng)2號位流入第二色譜柱，再經(jīng)第一切換閥的5號位，從第一切換閥的6號位直接流入廢液池，第二泵系統(tǒng)輸出流動相進(jìn)入第一切換閥的3號位，經(jīng)第一切換閥的4號位流出至第二切換閥的1號位，第二切換閥置于位置A，經(jīng)第二切換閥的6號位直接流入廢液池；

(4)設(shè)置第一切換閥處于A位置，第二切換閥處于A位置，第一色譜柱處于除后雜狀態(tài)，第二色譜柱處于除前雜狀態(tài)，第三色譜柱處于平衡狀態(tài)，當(dāng)?shù)诙V柱富集完畢，第一切換閥置于位置A，第一色譜柱洗脫的后雜蛋白直接流入廢液池，同時啟動第二泵系統(tǒng)，第二切換閥置于位置A，第二泵系統(tǒng)輸出流動相從第一切換閥的3號位經(jīng)2號位，流入第二色譜柱，第二色譜柱洗脫的前雜蛋白經(jīng)第一切換閥的5號位從4號位流出，流入第二切換閥的1號位，經(jīng)第二切換閥的6號位直接流入廢液池；

(5)當(dāng)?shù)诙袚Q閥的1號位與2號位連通、3號位與4號位連通、5號位與6號位連通時，第二切換閥處于B位置，設(shè)置第一切換閥處于A位置，第二切換閥處于B位置,第一色譜柱處于平衡狀態(tài)，第二色譜柱處于洗脫狀態(tài)，第三色譜柱處于富集狀態(tài)，當(dāng)?shù)诙V柱中前雜蛋白洗脫完畢，第二切換閥切換至位置B，第二色譜柱洗脫的目的蛋白經(jīng)第一切換閥的3號位流出，流經(jīng)第二切換閥的1號位，并從第二切換閥的2號位流入第三色譜柱，進(jìn)一步進(jìn)行分子排阻純化，此時第一切換閥仍置于位置A，對第一色譜柱進(jìn)行再生及平衡處理；

(6)設(shè)置第一切換閥處于A位置，第二切換閥處于A位置，第一色譜柱處于上樣狀態(tài)，第二色譜柱處于除后雜狀態(tài)，第三色譜柱處于除前雜狀態(tài)，第二色譜柱上目的蛋白洗脫完畢，第二切換閥置于狀態(tài)A，第二色譜柱洗脫的后雜蛋白經(jīng)第二切換閥的6號位直接流入廢液池，啟動第三泵系統(tǒng)，第三泵系統(tǒng)輸出流動相純水從第二切換閥的3號位經(jīng)2號位流入第三色譜柱，對目的蛋白進(jìn)一步洗脫純化，第三色譜柱洗脫的前雜蛋白流入廢液池，此時，第一色譜柱再生完畢，再次進(jìn)樣；

(7)設(shè)置第一切換閥處于B位置，第二切換閥處于A位置，第一色譜柱處于除前雜狀態(tài)，第二色譜柱處于平衡狀態(tài)，第三色譜柱處于洗脫狀態(tài)，再次進(jìn)樣后第一切換閥置于位置B，第一色譜柱洗脫前雜蛋白經(jīng)第二色譜柱后直接流入廢液池，第二切換閥置于位置A，第三色譜柱洗脫的目的蛋白進(jìn)入餾分池進(jìn)行收集，同時對第二色譜柱進(jìn)行再生及平衡處理；

(8)設(shè)置第一切換閥處于B位置，第二切換閥處于A位置，第一色譜柱處于洗脫狀態(tài)，第二色譜柱處于富集狀態(tài)，第三色譜柱處于除后雜狀態(tài)，待第一色譜柱中第二次進(jìn)樣的目的蛋白開始洗脫，第一切換閥置于位置B，蛋白流入第二色譜柱進(jìn)行富集，同時第三色譜柱繼續(xù)在第三泵系統(tǒng)流動相的淋洗下進(jìn)行后雜蛋白的洗脫；

(9)設(shè)置第一切換閥處于A位置，第二切換閥處于A位置；第一色譜柱處于除后雜狀態(tài)，第二色譜柱處于除前雜狀態(tài)，第三色譜柱處于平衡狀態(tài)，待第一色譜柱目的蛋白洗脫完畢，將第一切換閥切換至位置A，第二切換閥仍置于位置A，第一色譜柱后雜蛋白經(jīng)第一切換閥4號位流入第二切換閥的1號位，經(jīng)6號位直接流入廢液池，同時對第三色譜柱進(jìn)行再生及平衡處理；

(10)連續(xù)上樣運(yùn)行，重復(fù)步驟(4)-(8)。