[發明專利]茶葉中草銨膦的離子色譜-串聯質譜聯用檢測方法

在審

• 申請號: 201811124411.6
• 申請日: 2018-09-26
• 公開（公告）號: CN109212075A
• 公開（公告）日: 2019-01-15
• 發明（設計）人: 胡貝貞;韓超;沈燕;董文洪;宋偉華
• 申請（專利權）人: 胡貝貞
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 溫州甌越專利代理有限公司 33211
• 代理人: 于艷玲

本發明公開了一種茶葉中草銨膦的離子色譜?串聯質譜聯用檢測方法，樣品經一級水均質提取、樣品提取液以HR?X固相萃取小柱凈化、凈化后的樣液注入離子色譜系統，使用Dionex IonPac^TMAS19陰離子交換柱色譜柱分離，NaOH溶液洗脫，柱后流出液注入串聯四極桿質譜系統，在負離子模式下用多反應監測模式檢測其中含有的草銨膦，以保留時間和離子對比例進行定性確證，標準溶液外標法定量。本方法具有樣品前處理無需衍生化、簡便快速、凈化效果好，檢測靈敏度高、可同時進行定量和定性確證的特點。

技術領域

本發明屬于食品檢測技術領域，涉及離子色譜-串聯質譜聯用法，具體是指一種茶葉中草銨膦的離子色譜-串聯質譜聯用檢測方法。

背景技術

草銨膦是（glufosinate-ammonium）是德國赫斯特公司于上世紀 80年代開發的新型滅殺性除草劑，其產量在世界上僅次于草甘膦和百草枯，位居第三。草銨膦屬廣譜觸殺型除草劑，內吸作用不強，與草甘膦殺根不同，草銨膦先殺葉，通過植物蒸騰作用可以在植物木質部進行傳導，其速效性在百草枯和草甘膦之間。百草枯因為毒性問題已在23個國家被禁限用，草甘膦、百草枯在我國經過30多年的長期頻繁使用，抗性難除雜草越來越多，導致防效下降，而草銨膦因作用機理獨特，對一些難治雜草及對草甘膦和百草枯產生抗性的雜草有較好的防除效果，故近年來使用頻率不斷上升，特別是在茶園中的運用日益增加，其殘留問題越來越受到關注。

歐盟規定茶葉中草銨膦的殘留限量為0.1mg/kg，我國食品安全國家標準GB2763-2016規定了茶葉中草銨膦的殘留限量為0.5mg/kg，但未指定相應的檢測標準。茶葉作為有典型基質效應的經濟作物，其草銨膦檢測文獻報道較少。草銨膦的結構與草甘膦類似，含有膦酸基、 羥基、氨基，為極強的兩性化合物，難揮發，紫外光區無吸收。采用氣相色譜和氣相色譜-質譜法雖然具有較高的靈敏度，但需要衍生化，操作繁瑣。已有的植物源產品中（包括茶葉）草銨膦的文獻報道以及新頒布的GB23200.108-2018《食品安全國家標準 植物源性食品中草銨膦殘留量的測定 液相色譜-質譜聯用法》主要采用柱前衍生化-液相色譜串聯質譜法測定，通過芴代甲氧基酰氯（FMOC-Cl）在堿性介質中衍生，衍生產物在C₁₈液相柱上保留較好，在質譜儀上靈敏度好，但是過量的衍生試劑進入質譜對儀器部件不利。也有文獻報道采用親水作用的柱子（Hilic柱）分離、液相色譜-質譜聯用法直接測定果蔬、咖啡鮮果中的草銨膦殘留，但是Hilic柱需采用濃度較高的緩沖鹽作流動相，且對草銨膦保留作用也還是不夠強，導致草銨膦出峰較早且與樣品基質得不到有效分離，基質效應嚴重。另有文獻報道采用離子色譜法測定食品中的草銨膦、草甘膦和氨甲基膦酸，草銨膦等在離子交換柱上保留較好，但離子色譜法僅憑保留時間定性，無法作確證。

發明內容

本發明的目的是為了克服現有技術存在的缺點和不足，而提供茶葉中草銨膦的離子色譜-串聯四極桿質譜聯用檢測方法，該方法結合HR-X固相萃取小柱凈化、離子色譜-串聯質譜聯用法，能夠對茶葉中草銨膦同時進行定性和定量測定，該方法具有準確、快速、靈敏度高的優點，為草銨膦的快速檢測提供了可靠的分析方法。

本發明提供一種茶葉中草銨膦的離子色譜-串聯質譜聯用檢測方法，包括以下步驟，

（一）待測樣品的制備：取2.0g茶葉于50mL塑料離心中，加20mL水浸泡30min后用一級水均質提取2min，高速離心后取上層清液獲得待凈化液；

（二）待凈化液的凈化：取HR-X固相萃取小柱，加入0.5mL步驟（一）中的待凈化液，并棄去流出物，再加入步驟（一）中0.5 mL的待凈化液，并收集流出液，經0.22μm尼龍濾膜過濾后獲得待測樣品溶液；

（三）標準工作溶液的配制：配制草銨膦標準工作溶液，所述草銨膦標準工作溶液的濃度梯度分別為10μg/L,20μg/L,50μg/L,100μg/L,200μg/L,500μg/L；