[發明專利]茶葉中草銨膦的離子色譜-串聯質譜聯用檢測方法

在審

• 申請號: 201811124411.6
• 申請日: 2018-09-26
• 公開（公告）號: CN109212075A
• 公開（公告）日: 2019-01-15
• 發明（設計）人: 胡貝貞;韓超;沈燕;董文洪;宋偉華
• 申請（專利權）人: 胡貝貞
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 溫州甌越專利代理有限公司 33211
• 代理人: 于艷玲

1.一種茶葉中草銨膦的離子色譜-串聯質譜聯用檢測方法潘糖的檢測方法，其特征在于：包括以下步驟，

步驟（一）待測樣品的制備：取2.0g茶葉于50mL塑料離心中，加20mL水浸泡30min后用一級水均質提取2min，高速離心后取上層清液獲得待凈化液；

步驟（二）待凈化液的凈化：取HR-X固相萃取小柱，加入0.5mL步驟（一）中的待凈化液，并棄去流出物，再加入步驟（一）中0.5 mL的待凈化液，并收集流出液，經0.22μm尼龍濾膜過濾后獲得待測樣品溶液；

步驟（三）標準工作溶液的配制：配制草銨膦標準工作溶液，所述草銨膦標準工作溶液的濃度梯度分別為10μg/L,20μg/L,50μg/L,100μg/L,200μg/L,500μg/L；

步驟（四）草銨膦質譜MRM條件的優化：取1.0μg/mL的草銨膦標準溶液用注射器直接推入質譜，獲得可以確定母離子的草銨膦的一級質譜圖，確定母離子后，采用子離子掃描獲得二級質譜圖，從二級質譜圖中選取定量離子和定性離子，進行質譜參數優化，確定定量離子對和定性離子對；

步驟（五）待測樣品的檢測：將步驟（二）中的待測樣品溶液和步驟（三）中的草銨膦標準工作溶液在離子色譜-串聯質譜儀上分別進樣，獲得以標準工作溶液中草銨膦的濃度為橫坐標，以標準工作溶液中草銨膦定量離子對的峰面積為縱坐標的工作曲線，然后用工作曲線計算獲得待測樣品溶液中草銨膦的濃度。

2.根據權利要求1所述的茶葉中草銨膦的離子色譜-串聯質譜聯用檢測方法，其特征在于：所述步驟（二）中的固相萃取小柱填料為基于聚苯乙烯二乙烯基苯的苯磺酸改性樹脂，其活化過程為每60mg固相萃取小柱預先用3mL甲醇溶液和3mL超純水預淋洗。

3.根據權利要求1或2所述的茶葉中草銨膦的離子色譜-串聯質譜聯用檢測方法，其特征在于：所述的離子色譜-串聯質譜儀條件如下：

離子色譜條件：

色譜柱：2×250mm Dionex CarboPac^TM AS19 陰離子交換柱；

流速：250μL/min；

抑制器條件：AERS 500型陰離子抑制器，2mm；抑制電流31mA；

淋洗液：NaOH溶液；

淋洗濃度為：0至7.00min時采用濃度為20~50mmol/L的NaOH溶液淋洗，7.01至16.00min時采用濃度為50mmol/L的NaOH溶液淋洗，16.01~21.00min采用濃度為20mmol/L的NaOH溶液淋洗；

進樣量：10μL；

色譜柱溫度：30oC；

色譜柱后注入質譜前的有機溶劑補充劑：乙腈，50μL/min；

（二）質譜條件：

電噴霧離子源：負離子掃描，電壓為-2700V；

離子傳輸管溫度：270oC；

氮氣霧化氣壓力：25psi；

氮氣輔助氣壓力：8psi ；

氬氣碰撞氣壓力：1.5mTorr；

多反應監測離子對及碰撞電壓如下：定量離子對，180.0→95.2，碰撞電壓19V、定性離子對180.0→136.2， 碰撞電壓17V。