[發明專利]飼用乳酸菌的培養方法

在審

• 申請號: 201811123708.0
• 申請日: 2018-09-26
• 公開（公告）號: CN109082397A
• 公開（公告）日: 2018-12-25
• 發明（設計）人: 黃擁亮
• 申請（專利權）人: 黃擁亮
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/225
• 代理公司: 北京國翰知識產權代理事務所(普通合伙) 11696
• 代理人: 呂彩霞

本發明提供飼用乳酸菌的培養方法，屬于微生物技術領域，將活化后的飼用乳桿菌種子液接種到pH為6.3?6.7、含有乳清蛋白水解物的發酵培養基中進行震蕩培養，獲得飼用乳桿菌發酵液；其中乳清蛋白水解物為：將乳清蛋白用含有D構型酸的鹽酸溶液酸水解。本發明培養方法能實現高密度培養，所用發酵培養基能夠阻止氧對飼養乳酸菌的傷害，為飼用乳酸菌提供更多的ATP，延長發酵培養基對飼用乳酸菌的生長需要，提高飼用乳酸菌的酸脅迫抗性和繁殖數量，實現高密度培養。

技術領域

本發明屬于微生物技術領域，具體涉及飼用乳酸菌的培養方法。

背景技術

進入新世紀，我國的畜禽養殖業有了飛速的發展。規模化養殖進程越來越快，科技養殖也有了廣泛的應用。但是養殖業一直以來存在的弊端卻沒有得到很好的解決。如抗生素長期濫用導致的藥物殘留和細菌耐藥性，對人類的健康潛在著很大的危害。再者在畜禽養殖中產生的糞便和污水，如果沒有妥善的處理或利用，則會嚴重的污染環境，影響人類的生存。微生態學理論的提出和深入研究，是解決養殖業存在問題的主要手段，逐漸受到人們的重視。微生態制劑以其無殘留、無毒副作用、無耐藥性、成本低、效果顯著、對環境無污染等特點，逐漸得到養殖界的認同。

乳酸菌具有改善腸道微生態環境、增加營養物質利用率、提高動物機體免疫力等多種生物學功能，已被廣泛的應用于發酵食品、動物飼料和保健食品中。乳酸菌是生產微生物發酵飼料過程中使用最廣泛也是最常用的一類菌。我國農業部允許用作飼料添加劑的乳酸菌有：干酪乳桿菌、植物乳桿菌、糞鏈球菌、屎鏈球菌、乳酸片球菌、嗜酸乳桿菌、乳鏈球菌、唾液乳桿菌等。乳酸菌是腸道內的正常菌群，它們通過降解碳水化合物生成乳酸和其他有機酸使腸道環境的pH下降從而抑制其他微生物雜菌的生長繁殖，抵抗革蘭氏陰性致病菌，維持腸道中正常的生態平衡；增強體液免疫和細胞免疫，增強抗感染能力，增加機體腸黏膜的免疫調節活性，降解氨、吲哚、糞臭素等有害物質，并可產生一種特殊的抗菌活性蛋白-乳酸菌素，能有效抑制大腸桿菌和沙門氏菌的生長。乳酸菌的生產主要通過液體培養，但由于乳酸菌對營養和培養條件要求比較苛刻，并且在生長過程中不斷消耗營養底物和產生有機酸等代謝產物，抑制了菌體自身的生民繁殖，采用常規方法培養時培養液中的活菌數一般只能達到10⁷～10⁹cfu/mL，較低的生物量制約了乳酸菌的工業化生產及應用。高密度培養(HDC)是提高微生物產量的有效途徑和手段，由于不同菌種(或菌株)所能達到的最高菌體濃度相差較大目前對高密度培養沒有確切定義，一般是指在液體發酵培養中，采用一定的技術手段和設備將菌體密度提高到常規培養數倍以上的培養技術。相對于普通陪養，高密度培養的優勢在于可減少培養體積、縮短生產周期，獲得較高的目標菌體密度，減少動力消耗從而降低生產成本。乳酸菌的高密度培養已廣泛應用于乳制品行業而在詞料行業中的研究和應用才剛剛起步，仍有諸多技術難題尚待解決。

發明內容

本發明的目的在于提供一種能實現高密度培養的飼用乳酸菌發酵培養基，其所用培養基能夠阻止氧對飼養乳酸菌的傷害，為飼用乳酸菌提供更多的ATP，延長發酵培養基對飼用乳酸菌的生長需要，提高飼用乳酸菌的酸脅迫抗性和繁殖數量。

本發明為實現上述目的所采取的技術方案為：

飼用乳酸菌的培養方法，將活化后的飼用乳桿菌種子液接種到pH為6.3-6.7、含有乳清蛋白水解物的發酵培養基中進行震蕩培養，獲得飼用乳桿菌發酵液；其中乳清蛋白水解物為：將乳清蛋白用含有D構型酸的鹽酸溶液酸水解。本發明培養方法能實現高密度培養，所用培養基用乳清蛋白水解過程中D構型酸的存在能夠增加酸水解過程中D-型氨基酸的生成，而D-型氨基酸和一定聚合度的菊粉的存在使得到的乳清蛋白酸水解物能被飼用乳酸菌中存在的異型乳酸菌利用，而產生中間產物乙酰磷酸被轉化成乙酸，即一分子葡萄糖產生兩分子的三磷酸腺苷，這使得在發酵培養基內營養物質不變的情況下為飼用乳酸菌提供更多的ATP，延長發酵培養基對飼用乳酸菌的生長需要，提高飼用乳酸菌的酸脅迫抗性和繁殖數量，實現高密度培養。