[發(fā)明專利]一種出芽短梗霉菌株及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811118435.0
• 申請日: 2018-09-25
• 公開（公告）號: CN109136109B
• 公開（公告）日: 2021-02-26
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 魏培蓮;周丹鳳;呂磊磊;劉士旺;肖功年;龔金炎;柳永;鮑文娜;袁海娜
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江科技學院
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P7/62;C12R1/645
• 代理公司: 杭州賽科專利代理事務(wù)所(普通合伙) 33230
• 代理人: 魏星

1.一種出芽短梗霉菌株，其特征在于，所述出芽短梗霉菌株的保藏名稱為：出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)ZK-502，保藏單位：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，保藏日期：2018年08月20日，保藏編號：CGMCC No.16326。

2.一種權(quán)利要求1所述出芽短梗霉菌株的應(yīng)用，其特征在于，所述出芽短梗霉菌株在發(fā)酵生產(chǎn)liamocin中的應(yīng)用。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述出芽短梗霉菌株的應(yīng)用，其特征在于，包括以下步驟：

S1、菌種活化：將斜面菌種轉(zhuǎn)接至PDA斜面培養(yǎng)基中，于25～28℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)2～3d；

S2、種子培養(yǎng)：選取步驟S1中培養(yǎng)良好的斜面菌種，挑取2～3環(huán)接種于種子培養(yǎng)基中，于搖床25～28℃，150～200r/min培養(yǎng)2～3d；

S3、發(fā)酵培養(yǎng)：分為兩個階段：

(1)將步驟S2中培養(yǎng)好的種子液以6～10％的比例接種至發(fā)酵培養(yǎng)基(一)中，于搖床25～28℃，150～200r/min培養(yǎng)2～3d；

(2)將步驟(1)中培養(yǎng)結(jié)束后的培養(yǎng)液在無菌條件下7000～8000r/min離心5～10min，收取細胞轉(zhuǎn)移至發(fā)酵培養(yǎng)基(二)中，于搖床25～28℃，150～200r/min繼續(xù)培養(yǎng)5～7d；

S4、liamocin的提取：在經(jīng)步驟S3中步驟(2)發(fā)酵后的發(fā)酵液中加入適量有機溶劑，對發(fā)酵產(chǎn)生的liamocin進行萃取，然后旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)有機溶劑、干燥除去水分，獲得liamocin；

其中，所述步驟S2中種子培養(yǎng)基的組成為：5％葡萄糖、0.2％酵母提取物、0.5％KH₂PO₄、0.04％MgSO₄·7H₂O、0.04％MnSO₄·H₂O和0.1％NaCl；

所述步驟S3中發(fā)酵培養(yǎng)基(一)的組成為：5～7％碳源、0.1～0.2％有機氮源、0.5％K₂HPO₄、0.04％MgSO₄·7H₂O、0.04％MnSO₄·H₂O、0.1％NaCl和0.1～0.2％吐溫80；

所述步驟S3中發(fā)酵培養(yǎng)基(二)的組成為：5～7％碳源、0.1～0.2％無機氮源、0.5％K₂HPO₄、0.04％MgSO₄·7H₂O、0.04％MnSO₄·H₂O、0.1％NaCl和0.1～0.2％吐溫80。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述出芽短梗霉菌株的應(yīng)用，其特征在于，所述碳源為葡萄糖、木糖、蔗糖或麥芽糖。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述出芽短梗霉菌株的應(yīng)用，其特征在于，所述有機氮源為酵母提取物或蛋白胨。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述出芽短梗霉菌株的應(yīng)用，其特征在于，所述無機氮源為NH₄NO₃或NH₄(SO₄)₂。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述出芽短梗霉菌株的應(yīng)用，其特征在于，所述步驟S4中有機溶劑為：乙酸乙酯或甲基乙基酮。