[發明專利]靶向APRIL的嵌合抗原受體及其用途

在審

• 申請號: 201811113025.7
• 申請日: 2018-09-25
• 公開（公告）號: CN110938641A
• 公開（公告）日: 2020-03-31
• 發明（設計）人: 劉雅容
• 申請（專利權）人: 上海恒潤達生生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/62
• 分類號: C12N15/62;C12N15/867;C12N7/01;C12N5/10;C07K19/00;A61K35/17;A61P35/00
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1.一種多核苷酸序列，所述多核苷酸序列選自：

(1)含有依次連接的抗APRIL單鏈抗體的編碼序列、人CD8α鉸鏈區的編碼序列、人CD8跨膜區的編碼序列、人CD28胞內區的編碼序列、人41BB胞內區的編碼序列、人CD3ζ胞內區的編碼序列和任選的EGFR的含胞外結構域III和胞外結構域IV的片段的編碼序列的多核苷酸序列；和

(2)(1)所述多核苷酸序列的互補序列。

2.如權利要求1所述的多核苷酸序列，其特征在于，

在所述抗APRIL單鏈抗體的編碼序列前的所述信號肽的編碼序列如SEQ ID NO:1第1-63位核苷酸序列所示；和/或

所述抗APRIL單鏈抗體的編碼序列如SEQ ID NO:1第64-501位核苷酸序列所示；和/或

所述人CD8α鉸鏈區和CD8跨膜區的編碼序列如SEQ ID NO:1第502-708位核苷酸序列所示；和/或

所述人CD28胞內區的編碼序列如SEQ ID NO:1第709-831位核苷酸序列所示；和/或

所述人41BB胞內區的編碼序列如SEQ ID NO:1第832-975位核苷酸序列所示；和/或

所述人CD3ζ胞內區的編碼序列如SEQ ID NO:1第976-1308位核苷酸序列所示；和/或

所述EGFR的片段的編碼序列如SEQ ID NO:1第1453-2457位核苷酸序列所示。

3.一種融合蛋白，所述融合蛋白選自：

(1)含有依次連接的抗APRIL單鏈抗體、人CD8α鉸鏈區、人CD8跨膜區、人CD28胞內區、人41BB胞內區和人CD3ζ胞內區的融合蛋白和任選的EGFR的含胞外結構域III和胞外結構域IV的片段的編碼序列；和

(2)在(1)限定的氨基酸序列中經過取代、缺失或添加一個或幾個氨基酸且保留活化T細胞活性的由(1)衍生的融合蛋白。

4.如權利要求3所述的融合蛋白，其特征在于，所述融合蛋白具有以下一個或多個特征：

所述融合蛋白序列在所述抗APRIL單鏈抗體的編碼序列前還含有信號肽的編碼序列，優選地，所述信號肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第1-21位氨基酸所示；和/或

所述抗APRIL單鏈抗體的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第22-167位氨基酸所示；和/或

所述人CD8α鉸鏈區和跨膜區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第168-236位氨基酸所示；和/或

所述人CD28胞內區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第237-277位氨基酸所示；和/或

所述人41BB胞內區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第278-325位氨基酸所示；和/或

所述人CD3ζ胞內區的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第326-436位氨基酸所示；和/或

所述EGFR的片段含有EGFR的胞外結構域III、胞外結構域IV以及跨膜區，或由EGFR的胞外結構域III、胞外結構域IV以及跨膜區組成；優選地，所述片段含有人EGFR的第310-646位氨基酸序列，或由人EGFR的第310-646位氨基酸序列組成；優選地，所述片段的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第485-819位氨基酸所示。

5.一種核酸構建物，所述核酸構建物含有權利要求1-3中任一項所述的多核苷酸序列；

優選地，所述核酸構建物為載體；

更優選地，所述核酸構建物為逆轉錄病毒載體，含有復制起始位點，3’LTR，5’LTR，以及權利要求1-2中任一項所述的多核苷酸序列。

6.一種逆轉錄病毒，所述逆轉錄病毒含有權利要求5所述的核酸構建物，優選含有所述載體，更優選含有所述逆轉錄病毒載體。

7.一種基因修飾的T細胞或含該基因修飾的T細胞的藥物組合物，其特征在于，所述細胞含有權利要求1-2中任一項所述的多核苷酸序列，或含有權利要求5所述的核酸構建物，或感染了權利要求6所述的逆轉錄病毒，或穩定表達權利要求3-4中任一項所述的融合蛋白和任選的EGFR的含胞外結構域III、胞外結構域IV和任選的跨膜區的片段。