[發明專利]靶向APRIL的嵌合抗原受體及其用途

在審

• 申請號: 201811113025.7
• 申請日: 2018-09-25
• 公開（公告）號: CN110938641A
• 公開（公告）日: 2020-03-31
• 發明（設計）人: 劉雅容
• 申請（專利權）人: 上海恒潤達生生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/62
• 分類號: C12N15/62;C12N15/867;C12N7/01;C12N5/10;C07K19/00;A61K35/17;A61P35/00
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本發明涉及靶向APRIL的嵌合抗原受體及其用途。具體而言，本發明提供一種多核苷酸序列，選自：(1)含有依次連接的抗APRIL單鏈抗體的編碼序列、人CD8α鉸鏈區的編碼序列、人CD8跨膜區的編碼序列、人CD28胞內區的編碼序列、人41BB胞內區的編碼序列、人CD3ζ胞內區的編碼序列和任選的EGFR的含胞外結構域III和胞外結構域IV的片段的編碼序列的多核苷酸序列；和(2)(1)所述多核苷酸序列的互補序列。本發明還提供相關的融合蛋白、含所述編碼序列的載體，以及所述融合蛋白、編碼序列、載體的用途。

技術領域

本發明屬于嵌合抗原受體領域，具體涉及靶向BCMA的嵌合抗原受體及其用途。

背景技術

多發性骨髓瘤是一種惡性漿細胞疾病，表現為骨髓漿細胞惡性克隆性增生，分泌單克隆免疫球蛋白或其片段(M蛋白)，導致骨骼、腎臟等相關靶器官或組織損傷，常見臨床表現為骨痛、貧血、腎功能不全、感染等[Multiple myeloma.N Engl J Med,2011.364(11):p.1046-60.]。目前多發性骨髓瘤為血液系統第二大惡性腫瘤，占血液系統惡性腫瘤的10％，多發病于男性，其發病率隨著年齡的增長逐年增高，近幾年更是有年輕化的趨勢[Siegel,R.,et al.,Cancer statistics,2014.CA Cancer J Clin,2014.64(1):p.9-29.]。

增殖誘導配體(APRIL)，是BCMA 2個已經確定的配體中的1個，與B細胞激活因子(BAFF)相比其與漿細胞(PC)上的受體的親和力更強特異性更高，但不存在于其他B和T譜系細胞中。APRIL除了與BCMA結合外，還與跨膜激活劑和鈣調節劑受體(TACI)結合，TACI在惡性PC腫瘤患者上過表達。APRIL主要由骨髓細胞分泌，其具有維持多發性骨髓瘤浸潤的異常骨髓細胞生長的作用。在離體培養實驗中，破骨細胞(OC)刺激多發性骨髓瘤生長同時也刺激了疾病進展期間的骨病變，比CD14+未刺激的單核細胞分泌更多的APRIL。與BAFF相比，APRIL除了受體介導的效應，還可以促進惡性漿細胞的存活通過與硫酸乙酰肝素蛋白多糖CD138相互作用，那么CD138具有調節生長因子信號傳導，細胞骨架組成和細胞粘附和遷移等作用。APRIL可以拯救白細胞介素6(IL-6)依賴的多發性骨髓瘤細胞系在培養過程中剝奪了IL-6免受凋亡。總的來說，這些結果表明存在一種潛在的治療策略，即用APRIL單克隆抗體來防止骨髓瘤細胞中的BCMA活化。

靶向BCMA的作用可以被補充通過阻斷其與配體APRIL和BAFF的結合，由于MM患者的亞細胞的也表達TACI，其能夠與APRIL和BAFF相結合。但是，TACI表達模式并不受BCMA的限制其在正常T和B細胞中也存在。中和BAFF單克隆抗體(LY2127355)并聯合硼替佐米處理的MM患者，檢測實驗具有良好的耐受性和安全概況。Atacicept，是一種融合蛋白，它結合并中和BAFF和APRIL，旨在通過TACI阻斷B細胞的活化。它能夠抑制患者MM細胞增殖和誘導細胞凋亡。第一個治療性的APRIL中和單克隆抗體已經用于在MM的臨床前研究。具體機制是阻斷APRIL誘導的信號級聯通過BCMA，在骨髓環境進一步抑制MM細胞的生長和存活。抗APRIL單克隆抗體可以與抗-BCMA抗體藥物結合或與裸的單克隆抗體結合以進一步增強其中任一的細胞毒性，并克服骨髓微環境中的耐藥性。

嵌合抗原受體(Chimeric Antigen Receptor-T cell，CAR-T)T細胞是指經基因修飾后，能以MHC非限制性方式識別特定目的抗原，并且持續活化擴增的T細胞。2012年國際細胞治療協會年會中指出生物免疫細胞治療已經成為手術、放療、化療外的第四種治療腫瘤的手段，并將成為未來腫瘤治療必選手段。CAR-T細胞回輸治療是當前腫瘤治療中最明確有效的免疫治療形式。大量研究表明，CAR-T細胞可以有效的識別腫瘤抗原，引起特異性的抗腫瘤免疫應答，顯著改善患者的生存狀況。