[發(fā)明專利]地熊蜂actin蛋白的抗體及其制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811104330.X
• 申請日: 2018-09-19
• 公開（公告）號: CN109265544A
• 公開（公告）日: 2019-01-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐凱;牛慶生;劉玉玲;王志;王振偉;牛犇
• 申請（專利權(quán)）人: 吉林省養(yǎng)蜂科學(xué)研究所（吉林省蜂產(chǎn)品質(zhì)量管理監(jiān)督站;吉林省蜜蜂遺傳資源基因保護(hù)中心）
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18;C07K16/06
• 代理公司: 北京超凡志成知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11371
• 代理人: 李進(jìn)

本發(fā)明提供了地熊蜂actin蛋白的抗體及其制備方法，屬于蛋白質(zhì)及抗體生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明提供的地熊蜂actin蛋白的抗體，具有地熊蜂的actin蛋白的識別位點(diǎn)，特異的識別地熊蜂的actin蛋白，特異性較高。通過地熊蜂actin蛋白的抗體的制備方法能快速高效的制備出具有特異性的地熊蜂actin蛋白的抗體，操作簡單方便，具有較高的使用應(yīng)用價值。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及蛋白質(zhì)及抗體生物技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及地熊蜂actin蛋白的抗體及其制備方法。

背景技術(shù)

Actin是細(xì)胞的一種重要骨架蛋白；同時Actin在細(xì)胞分泌、吞噬、移動、胞質(zhì)流動和胞質(zhì)分離等過程中起重要作用。actin基因是當(dāng)前昆蟲基因功能研究中的看家基因，該基因在不同組織以及不同的個體間的表達(dá)量基本一致，可在昆蟲基因表達(dá)研究中做為校正。Actin是Western Blotting很好的內(nèi)參基因。內(nèi)參即是內(nèi)部參照(Internal Control)，它們在各組織和細(xì)胞中的表達(dá)相對恒定，在檢測蛋白的表達(dá)水平變化時常用它來做校正。

由于當(dāng)前還沒有商業(yè)用的膜翅目昆蟲actin抗體，所以在研究地熊蜂功能基因的蛋白定位、表達(dá)以及生物學(xué)功能時，需要制備特定的actin抗體進(jìn)行蛋白表達(dá)的校正，滿足下一步的試驗(yàn)需要。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一目的在于提供地熊蜂actin蛋白的抗體，該抗體能特異識別地熊蜂actin蛋白。

本發(fā)明的第二目的在于提供地熊蜂actin蛋白的抗體的制備方法，該方法能快速獲得效價較高的地熊蜂actin蛋白的抗體，效果良好。

為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，采用以下技術(shù)方案：

地熊蜂actin蛋白的抗體，抗體識別的地熊蜂actin蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示。

地熊蜂actin蛋白的抗體的制備方法，包括以下步驟：

合成如SEQ ID NO.1所示地熊蜂actin蛋白的氨基酸序列作為多肽抗原序列；

通過KLH偶聯(lián)方法進(jìn)行多肽鏈偶聯(lián)并脫鹽得到免疫抗原；

將550-630μg免疫抗原注射入宿主動物進(jìn)行免疫，并于第13-15日、第20-22日和第27-30日進(jìn)行加強(qiáng)免疫；

在第二次加強(qiáng)免疫時取血實(shí)驗(yàn)并觀測宿主動物，在免疫第32-38天放血獲得地熊蜂actin蛋白的抗體。

與現(xiàn)有技術(shù)相比較，本發(fā)明的有益效果包括：本發(fā)明提供的地熊蜂actin蛋白的抗體，具有地熊蜂的actin蛋白的識別位點(diǎn)，特異的識別地熊蜂的actin蛋白，特異性較高。通過地熊蜂actin蛋白的抗體的制備方法能快速高效的制備出具有特異性的地熊蜂actin蛋白的抗體，操作簡單方便，具有較高的使用應(yīng)用價值。

附圖說明

為了更清楚地說明本發(fā)明實(shí)施例的技術(shù)方案，下面將對實(shí)施例中所需要使用的附圖作簡單地介紹，應(yīng)當(dāng)理解，以下附圖僅示出了本發(fā)明的某些實(shí)施例，因此不應(yīng)被看作是對范圍的限定，對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他相關(guān)的附圖。

圖1為本發(fā)明實(shí)驗(yàn)例提供的western blotting試驗(yàn)結(jié)果圖。

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行詳細(xì)描述，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，下列實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中未注明具體條件者，按照常規(guī)條件或制造商建議的條件進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市售購買獲得的常規(guī)產(chǎn)品。

下面對本發(fā)明實(shí)施例的地熊蜂actin蛋白的抗體及其制備方法進(jìn)行具體說明。