[發明專利]地熊蜂actin蛋白的抗體及其制備方法

在審

• 申請號: 201811104330.X
• 申請日: 2018-09-19
• 公開（公告）號: CN109265544A
• 公開（公告）日: 2019-01-25
• 發明（設計）人: 徐凱;牛慶生;劉玉玲;王志;王振偉;牛犇
• 申請（專利權）人: 吉林省養蜂科學研究所（吉林省蜂產品質量管理監督站;吉林省蜜蜂遺傳資源基因保護中心）
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18;C07K16/06
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 李進

1.地熊蜂actin蛋白的抗體，其特征在于，所述抗體識別的地熊蜂actin蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根據權利要求1所述的地熊蜂actin蛋白的抗體，其特征在于，編碼所述如SEQ IDNO.1所示地熊蜂actin蛋白的堿基序列如SEQ ID NO.2所示。

3.地熊蜂actin蛋白的抗體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

合成如SEQ ID NO.1所示地熊蜂actin蛋白的氨基酸序列作為多肽抗原序列；

通過KLH偶聯方法進行多肽鏈偶聯并脫鹽得到免疫抗原；

將550-630μg所述免疫抗原注射入宿主動物進行免疫，并于第13-15日、第20-22日和第27-30日進行加強免疫；

在第二次加強免疫時取血實驗并觀測所述宿主動物，在免疫第32-38天放血獲得地熊蜂actin蛋白的抗體。

4.根據權利要求3所述的地熊蜂actin蛋白的抗體的制備方法，其特征在于，所述多肽抗原序列的純度大于75％。

5.根據權利要求4所述的地熊蜂actin蛋白的抗體的制備方法，其特征在于，所述宿主動物為新西蘭兔。

6.根據權利要求5所述的地熊蜂actin蛋白的抗體的制備方法，其特征在于，所述免疫抗原的總注射量為1500μg。

7.根據權利要求5所述的地熊蜂actin蛋白的抗體的制備方法，其特征在于，還包括所述地熊蜂actin蛋白的抗體的血清效價評價。

8.根據權利要求7所述的地熊蜂actin蛋白的抗體的制備方法，其特征在于，所述血清效價評價包括將所述多肽抗原序列與BSA偶聯脫鹽得到多肽-BSA偶聯劑，通過多肽抗原序列和多肽-BSA偶聯劑進行包被，并用地熊蜂actin蛋白的抗體進行ELISA分析評價。

9.根據權利要求8所述的地熊蜂actin蛋白的抗體的制備方法，其特征在于，所述多肽抗原序列的用量為0.5mL。

10.根據權利要求9所述的地熊蜂actin蛋白的抗體的制備方法，其特征在于，所述多肽抗原序列和多肽-BSA偶聯劑的包被量為100ng/孔。