[發明專利]一種類風濕關節炎新型生物標記物及其篩選方法

在審

• 申請號: 201811099501.4
• 申請日: 2018-09-20
• 公開（公告）號: CN109342717A
• 公開（公告）日: 2019-02-15
• 發明（設計）人: 舒強;王云情;孫姣;隋雅夢;郭偉;王飛英;李棟;李國盛
• 申請（專利權）人: 山東大學深圳研究院
• 主分類號: G01N33/533
• 分類號: G01N33/533
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所 37218
• 代理人: 李桂存

本發明提供了一種新型生物標記物，Galectin?9，它通過參與RA患者的炎癥進程及滑膜血管生成而調節RA發生機制，能反映RA患者炎癥、免疫細胞失調和血管生成三方面的水平；而且血漿Galectin?9濃度可以快速準確衡量RA患者病情活動度。同時本發明也提供了其篩選方法，從各個方面驗證Galectin?9可以作為RA患者的新型生物標記物。

技術領域

本發明屬于生物技術領域，尤其涉及一種新型類風濕關節炎生物標記物及其篩選方法。

背景技術

類風濕關節炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種危害人類健康的常見自身免疫性疾病，至今仍無根治方法。既往研究證實RA患者存在T細胞亞群失衡而導致的免疫失調；同時血循環中活化的炎癥因子如腫瘤壞死因子（TNF-α）等促進全身炎癥反應。RA的基本病理改變是關節滑膜炎，受累關節滑膜中有大量淋巴和單核細胞、炎癥因子浸潤。另一方面，增生的滑膜中有豐富的新生血管即血管翳出現，血管內皮生長因子（VEGF）高表達。全身和局部炎癥反應與滑膜血管生成相互促進，不斷加重RA患者骨侵蝕，導致骨和軟骨破壞關節殘疾。

因此在RA的發病機制中血管生成與免疫細胞失調、炎癥反應互相促進三者環環相扣惡性循環，破譯并阻斷三者的偶聯機制對RA達標治療非常重要。理想的RA生物標記物也應該能反映炎癥、免疫細胞失調和血管生成三方面的變化。

RA患者可以出現類風濕因子（RF）和抗CCP等特異的自身抗體，為疾病診斷提供明確依據；但這些抗體水平與病情活動度無關，不能評估和指導治療。

目前臨床常用的RA病情活動度評估方法均是基于患者受累關節的腫脹、疼痛數目的臨床指標和血沉、C反應蛋白這兩個炎癥指標的組合，基本能反映患者的病情。但是后二者對于特殊亞型及患者合并感染時的則無能為力。

Gal-9（Galectin-9）作為半乳凝素家族的一員，廣泛表達于幾乎所有種類的細胞上，具有影響細胞增殖分化、炎癥、免疫調節及腫瘤形成的多種功能。既往認為其通過受體Tim-3在自身免疫病中發揮免疫負調控的作用。而近年研究發現Gal-9具有促進先天免疫調節、調控細胞增殖和腫瘤發生多方面功能。

發明內容

針對上述問題，本發明提供了一種新型生物標記物，Galectin-9，通過參與RA患者的炎癥進程及滑膜血管生成而調節RA發生機制，反映炎癥、免疫細胞失調和血管生成三方面的水平；而且血漿Galectin-9水平可以快速準確衡量RA的病情活動度，為RA患者提供一種新型生物標記物，同時本發明也提供了其篩選方法。

一種類風濕關節炎新型生物標記物，為Galectin-9，簡稱為Gal-9。

一種上述生物標記物的篩選方法，包括：

（1）收集RA患者關節腫痛癥狀體征、血沉和C反應蛋白等臨床資料計算出治療前后RA患者病情活動度指標；

（2） ELISA 方法檢測血漿中Gal-9和炎癥因子的水平；

（3）流式檢測技術測定外周血T細胞各亞群上Gal-9的表達。

步驟（1）中所述的RA患者，為符合1987年診斷標準的RA成年患者；所述的病情活動度指標為：以他克莫司為主的治療方案使用前后，患者DAS28、SDAI、CDAI指標中的一種或多種。

所述的步驟（2）篩選方案如下：收集符合1987年診斷標準，他克莫司治療前后的RA患者及健康對照者的血漿，ELISA實驗方法檢測受試者血漿中Gal-9的濃度。