[發明專利]用于硫嘌呤類藥物的用藥相關基因分型試劑盒和分型方法

在審

• 申請號: 201811098669.3
• 申請日: 2018-09-20
• 公開（公告）號: CN109486932A
• 公開（公告）日: 2019-03-19
• 發明（設計）人: 周連群;李金澤;張芷齊;李傳宇;姚佳;張威;郭振
• 申請（專利權）人: 中國科學院蘇州生物醫學工程技術研究所
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6886;C12Q1/6858
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產權代理有限公司 11250
• 代理人: 李敏

本發明屬于基因擴增檢測的技術領域，具體涉及用于硫嘌呤類藥物的用藥相關基因分型試劑盒及分型方法，首創性的發現在基因擴增檢測中使用納米二氧化硅，可以顯著提高基因擴增的反應效率和反應特異性，為此將其應用到硫嘌呤類藥物的用藥相關基因分型的檢測中，解決了現有技術中硫嘌呤類藥物的用藥相關基因分型特異性差、檢測速度慢，不能滿足對大量樣本的快速的、特異性高的檢測的問題。

技術領域

本發明屬于基因擴增檢測的技術領域，具體涉及用于硫嘌呤類藥物的用藥相關基因分型試劑盒和分型方法。

背景技術

世界衛生組織研究結果表明，藥物安全性問題是住院病人致死的最重要原因之一，甚至居于全部死亡原因的第五位。藥物遺傳學和基因組學的研究結果表明，藥物代謝酶的單核苷酸多態性(single nucleotide polymorphisms，SNP)可以決定藥物代謝酶的活性，從而影響藥物的臨床療效和毒性程度。SNP存在差異的不同個體服用同一種藥物時，該藥物的臨床療效和毒性程度也存在個體化差異。因此，如何分析和鑒別個體之間藥物代謝酶的SNP差異，并利用這種差異來合理地指導臨床用藥和進行藥物組合已經成為日益關注的一個焦點。

硫嘌呤類藥物，包括硫鳥嘌呤(6-thioguanine，6-TG)、6-巰基嘌呤(6-mercaptopurine，6-MP)及其前體藥物硫唑嘌呤(Azathioprine，AZA)，于上世紀50年代由G.B.Elion和GH.Hitchings首先發現。6-TG和6-MP用于炎癥性腸病(Inflammatory BowelDisease，IBD)穩定期的誘導和維持治療，同時也是治療兒童急性淋巴細胞白血病(AcuteLymphoblastic Leukemia，ALL)最為廣泛應用的藥物之一。AZA則主要用于自身免疫性疾病(Autoimmune Disease，AD)及器官移植后排斥反應的治療。

硫嘌呤類藥物本身并不具備藥物作用活性或只有很低的藥物作用活性，它們在體內需經酶催化生成活性代謝產物6-硫鳥苷酸(6-thioguanine Nucleotides，6-TGNs)。6-TGNs作為鳥嘌呤核苷的拮抗劑參入脫氧核糖核酸(Deoxyribonucleic Acid，DNA)和核糖核酸(Ribonucleic Acid，RNA)分子，通過抑制DNA的轉錄、復制和RNA的表達而發揮細胞毒作用進而發揮藥理作用。硫嘌呤類藥物的臨床藥物療效和藥物不良反應存在明顯個體差異，大約67％服用者有效，約15％的服用者無效，另外還有大約17％的服用者會發生非常嚴重的甚至能危及生命的藥物不良反應，如骨髓抑制、肝臟毒副作用、胰腺炎等。

近來年，硫嘌呤類藥物的藥效及其不良反應的個體化差異，已被證實與硫嘌呤類藥物途徑中相關酶的單核苷酸多態性存在密切聯系，因此，開發能夠快速、高特異性檢測硫嘌呤類藥物相關基因多態性的試劑盒，對于合理、個體化、安全地使用硫嘌呤類藥物進行治療具有重要的臨床意義。

發明內容

因此，本發明要解決的技術問題在于提供一種能夠快速、高特異性實現硫嘌呤類藥物的用藥相關基因分型試劑盒。

為此，本發明提供如下技術方案：

第一方面，本發明提供了一種用于硫嘌呤類藥物的用藥相關基因分型試劑盒，所述試劑盒包括核酸擴增試劑、基于硫嘌呤類藥物的個體化用藥相關基因設計的引物和熒光探針，所述核酸擴增試劑包括納米二氧化硅。

可選地，上述的試劑盒，所述納米二氧化硅的粒徑為50～500nm。優選的，所述納米二氧化硅為球狀。