[發明專利]一株海洋弧菌及其分離方法與應用

在審

• 申請號: 201811091769.3
• 申請日: 2018-09-19
• 公開（公告）號: CN109161504A
• 公開（公告）日: 2019-01-08
• 發明（設計）人: 趙哲;劉宇鵬;史燕;吳超;朱馨媛
• 申請（專利權）人: 河海大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/02;C12N9/24;C12R1/63
• 代理公司: 南京縱橫知識產權代理有限公司 32224
• 代理人: 嚴曉彪;董建林

1.一株海洋弧菌，其特征在于，其保藏號為CGMCC NO.16232，于2018年8月8日保藏于中國普通微生物菌種保藏管理中心，菌種鑒定分析顯示為Vibrio astriarenae。

2.根據權利要求1所述的一株海洋菌株，其特征在于，應用于產瓊脂糖酶。

3.根據權利要求2所述的一株海洋菌株，其特征在于，所述瓊脂糖酶，應用于制備酶制品。

4.根據權利要求1所述的一株海洋菌株的分離方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、將待篩選菌株劃線于TCBS培養基，恒溫培養，進行復蘇；挑取單菌落，接種于含NaCl的TSB培養基中，恒溫震蕩培養；

S2、取震蕩培養后的菌液，點在含NaCl的TSA平板上，恒溫正置培養后，篩選保存。

5.根據權利要求4所述的一株海洋菌株的分離方法，其特征在于，所述步驟S1中的待篩選菌株，來源于華南沿海地區海水樣本。

6.根據權利要求4所述的一種海洋菌株的分離方法，其特征在于，所述TCBS培養基包括：5g/L酵母粉，10g/L蛋白胨，10g/L硫代硫酸鈉，10g/L枸櫞酸鈉，5g/L牛膽粉，3g/L牛膽酸鈉，20g/L蔗糖，10g/L氯化鈉，1g/L檸檬酸鐵，0.04g/L溴麝香草酚蘭，0.04g/L麝香草酚蘭，15g/L瓊脂；

所述TSB培養基包括：磷酸氫二鈉6g/L，磷酸二氫鉀3g/L，氯化鈉0.5g/L，氯化銨1g/L，維生素B1 2mg/L，硫酸鎂1mM，氯化鈣0.1mM和0.2％葡萄糖。

7.根據權利要求4所述的一株海洋菌株的分離方法，其特征在于，所述步驟S1中的恒溫培養的溫度為30℃，時間為24h；震蕩培養的溫度為30℃，轉速為200r·min^-1，NaCl的質量體積百分比為1.5％；

步驟S2中的菌液為5μL，NaCl的質量體積百分比為1.5％；正置培養的溫度為30℃，時間為24～48h。

8.一株產瓊脂糖酶的海洋弧菌的分離方法，其特征在于，基于權利要求4所述的海洋菌株的分離方法，所述正置培養后的平板用盧戈氏碘液染色，觀測平板上菌落周圍的凹陷情況以及染色后出現的透明圈，測量透明圈的大小以確定細菌具有的降解瓊脂糖的能力，獲得海洋弧菌HN897。