[發(fā)明專利]一種提高青花菜離體再生效率的組織培養(yǎng)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811088523.0
• 申請(qǐng)日: 2018-09-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109169278B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-12-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曾愛(ài)松;李家慶;嚴(yán)繼勇;宋立曉;許園園
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32204
• 代理人: 丁靜靜;肖明芳

1.一種提高青花菜離體再生效率的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）外植體選擇

取青花菜花球成熟期的外葉，滅菌處理，滅菌后，將葉片切成邊長(zhǎng)為1.0～1.5 cm的外植體方塊；

（2）分化誘導(dǎo)

把外植體方塊接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，置于溫度為25±0.5 ℃的培養(yǎng)室中，每天光照時(shí)間為14h；

（3）繼代增殖

將步驟（2）誘導(dǎo)產(chǎn)生的單芽或叢生芽，轉(zhuǎn)接到繼代增殖培養(yǎng)基上，25~30 d轉(zhuǎn)接一次，光照培養(yǎng)環(huán)境為：白光，光照時(shí)間為14 h/d，培養(yǎng)溫度為25±0.5 ℃；

（4）生根誘導(dǎo)

幼芽生長(zhǎng)至3~4 cm高時(shí)，將其轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上；光照培養(yǎng)環(huán)境為：白光，光照時(shí)間為14 h/d，培養(yǎng)溫度為25±0.5 ℃；

（5）移栽與定植

生根苗在室溫下煉苗24h后，移植到穴盤(pán)中生長(zhǎng)，基質(zhì)為十字花科蔬菜育苗基質(zhì)；待幼苗長(zhǎng)到5~7片真葉定植到大田；

步驟（2）中，所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.2 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA+6~7 g/L瓊脂+25~30g蔗糖, pH5.8；

步驟（2）中，培養(yǎng)室中光照條件為白光燈：紅光燈=3:1；

步驟（3）中，所述繼代增殖培養(yǎng)基為MS+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L 6-BA+6~7 g/L瓊脂+25~30 g蔗糖, pH5.8；

步驟（4）中，所述生根培養(yǎng)基為MS+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/L IBA+7~8 g/L瓊脂+20~25g蔗糖, pH5.8。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提高青花菜離體再生效率的組織培養(yǎng)方法，其特征在于，步驟(1)中，所述滅菌處理的方法如下：

采用體積分?jǐn)?shù)75%的乙醇對(duì)葉片滅菌1~2 min，然后用體積分?jǐn)?shù)8~9 %的次氯酸鈉消毒15~20 min，最后用無(wú)菌水沖洗。