[發明專利]一種移植用牙髓間充質干細胞微球的制備體系在審
| 申請號: | 201811085961.1 | 申請日: | 2018-09-18 |
| 公開(公告)號: | CN109251889A | 公開(公告)日: | 2019-01-22 |
| 發明(設計)人: | 不公告發明人 | 申請(專利權)人: | 中晶生物技術股份有限公司 |
| 主分類號: | C12N5/0775 | 分類號: | C12N5/0775;A61K35/28;A61P1/02 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 101111 北京市大*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 間充質干細胞 牙髓 制備 移植 微球 組織損傷修復 培養細胞 球狀結構 三維立體 三維培養 搖動裝置 干性 細胞 | ||
1.人牙髓間充質干細胞的制備,采用了一種三維擺動培養體系。
2.根據權利要求1所述的牙髓間充質干細胞微球的搖擺培養體系,其特征在于該體系能夠使牙髓間充質干細胞不貼壁生長,并能形成三維球狀立體結構。
3.根據權利要求2所述的牙髓間充質干細胞微球的搖擺培養體系,其特征在于該體系包含有1-10個水平放置的搖擺槽,能夠將多個培養瓶或培養皿水平地放在該搖擺槽內。
4.根據權利要求3所述的牙髓間充質干細胞微球的培養體系,其特征在于該體系能夠保持恒定的轉速,在一定空間內搖擺,且轉速范圍為50~300rpm。
5.根據權利要求4所述的牙髓間充質干細胞微球的培養體系,其特征在于該體系能夠與細胞培養箱兼容。
6.根據權利要求5所述的牙髓間充質干細胞微球的制備方法,接種于細胞培養瓶或細胞培養皿中,牙髓間充質干細胞的密度為4×104~1×106個。
7.根據權利要求6所述的牙髓間充質干細胞微球的制備體系,將常規方法培養的第1~6代牙髓間充質干細胞傳代至新的培養瓶或培養皿,將這些培養瓶或培養皿放入牙髓干細胞三維培養體系中,并將此裝置放入細胞培養箱內,培養條件為溫度37℃,CO2濃度為5%。
8.根據權利要求7所述的牙髓間充質干細胞微球的獲得方法,待細胞微球體擴增至直徑為40~200um時,將含細胞球的培養體系移出,使用300-800rpm離心收集細胞球。
9.根據權利要求8所述的三維形態的干細胞球,將收集的細胞球使用0.9%的生理鹽水進行洗滌3-6次,收集三維形態的干細胞球,使用0.1-30毫升體積進行重懸,待用。
10.根據權利要求9所述的三維干細胞球懸液,使用0.5-3mm針孔注射器將微球體吸出,注入到相應移植靶組織中。
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