[發(fā)明專利]一種番杏組織培養(yǎng)快速繁殖方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811083287.3
• 申請日: 2018-09-17
• 公開（公告）號: CN109349103B
• 公開（公告）日: 2020-11-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王強(qiáng);黃林生;陳國華;陳冬怡;陳紅鋒
• 申請（專利權(quán)）人: 中國科學(xué)院華南植物園
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 廣州科粵專利商標(biāo)代理有限公司 44001
• 代理人: 胡素麗;劉明星

本發(fā)明公開了一種番杏組織培養(yǎng)快速繁殖方法。本發(fā)明從種子萌發(fā)獲得無菌苗到獲得栽培苗只需要90d，大大加快了番杏的繁殖速度，通過繼代增殖，每個(gè)月可以增殖10.33倍左右，因此可以在短時(shí)間內(nèi)獲得大量的組培苗，組培苗經(jīng)過移栽后，其成活率高達(dá)86％，從而能夠使番杏這傳統(tǒng)的中草藥和新型的蔬菜能都更好的發(fā)展，為今后更進(jìn)一步利用該物種奠定良好的基礎(chǔ)。本發(fā)明的方法操作簡單，易于實(shí)施，所用的培養(yǎng)基和試劑易配置，成本低，易大范圍推廣。

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于植物繁殖領(lǐng)域，具體涉及一種番杏組織培養(yǎng)快速繁殖方法。

背景技術(shù)：

番杏(Tetragonia tetragonioides)系番杏科(Aizoaceae)番杏屬(Tetragonia)肉質(zhì)草本，目前主要分布在江蘇、浙江、福建、廣東、云南等地。其使用方法也呈現(xiàn)一定的地域性，在云南主要作為一種傳統(tǒng)草藥，清熱解毒、祛風(fēng)消腫，在廣東地區(qū)則多作為一種野生蔬菜，藥食同源，治療腸炎、敗血癥等。現(xiàn)代研究表明，番杏具有很好的抗癌、消炎、免疫調(diào)節(jié)、降血脂等功效。

利用植物外植體在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，獲得愈傷組織或完整植株，即為植物組織培養(yǎng)，也稱離體培養(yǎng)或外植體培養(yǎng)。由于不同類型的植物在離體培養(yǎng)所需要的培養(yǎng)條件及方法等方面存在很大的不同，根據(jù)具體的植物，調(diào)整培養(yǎng)基類型、培養(yǎng)光照及溫度、不同培養(yǎng)階段培養(yǎng)基生長調(diào)節(jié)劑配比，分別誘導(dǎo)不定芽的形成，在此基礎(chǔ)上建立有效的芽繁殖體系和植株再生體系。目前運(yùn)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)開展植物的保護(hù)和繁殖在很多植物種上已獲得成功。

但是，到目前為止，番杏的組織培養(yǎng)方面的研究，國內(nèi)報(bào)道很少，且本研究與前人的研究有很多不同。

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種能在短期內(nèi)獲得大量番杏栽培苗的番杏組織培養(yǎng)快速繁殖方法。

本發(fā)明的番杏組織培養(yǎng)快速繁殖方法，包括以下步驟：

S1、無菌苗的獲取：將番杏(Tetragonia tetragonioides)種子進(jìn)行消毒處理，將消毒處理后的番杏種子接種于萌發(fā)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件為22～28℃，光照強(qiáng)度為50～60μmol m^-2s^-1，光照12～13h/d，直至長出無菌苗，所述的萌發(fā)培養(yǎng)基為：每升含有6-芐氨基嘌呤1.0～3.0mg，其余成份為MS培養(yǎng)基，pH為5.9；

S2、不定芽的誘導(dǎo)：將無菌苗的莖段作為外植體，將外植體進(jìn)行消毒處理，將消毒處理后的外植體接種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為22～28℃，光照強(qiáng)度為50～60μmolm^-2s^-1，光照12～13h/d，直至誘導(dǎo)出不定芽，所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：每升含有N-苯基-N′-1，2，3-噻二唑-5-脲0.5～1.0mg或6-芐氨基嘌呤1.0mg，α-萘乙酸0.1mg或吲哚-3-丁酸0.1mg，其余成份為1/2MS培養(yǎng)基，pH為5.9；

S3、繼代增殖：將不定芽轉(zhuǎn)入增殖培養(yǎng)基中進(jìn)行不定芽的增殖，培養(yǎng)條件為22～28℃，光照強(qiáng)度為50～60μmol m^-2s^-1，光照12～13h/d，繼代增殖得到的不定芽能用于生根培養(yǎng)或者繼續(xù)繼代增殖，所述的增殖培養(yǎng)基為：每升含有6-芐氨基嘌呤0.5～2.0mg和α-萘乙酸0.1～0.3mg，其余成份為1/2MS培養(yǎng)基，pH為5.9；

S4、生根培養(yǎng)：將繼代增殖得到的不定芽轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件為22～28℃，光照強(qiáng)度為50～60μmol m^-2s^-1，光照12-13h/d，使不定芽生根，長成組培苗，所述的生根培養(yǎng)基為：每升含有吲哚-3-丁酸1.0～2.0mg或α-萘乙酸0.5mg，其余成份為1/2MS培養(yǎng)基，pH為5.9；

S5、組培苗移栽：將組培苗移植到栽培基質(zhì)中，置于濕潤、遮蔭的環(huán)境下培養(yǎng)，澆水，施肥以滿足組培苗生長所需的水分和營養(yǎng)需要，經(jīng)常規(guī)培養(yǎng)后獲得栽培苗。