[發(fā)明專利]一種硅納米粒子/金納米簇比率熒光探針的合成及其對(duì)利福平比率熒光檢測(cè)的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811077865.2
• 申請(qǐng)日: 2018-09-16
• 公開（公告）號(hào): CN109097029B
• 公開（公告）日: 2021-04-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孟磊;徐娜;蘭承武
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 吉林化工學(xué)院
• 主分類號(hào): C09K11/59
• 分類號(hào): C09K11/59;B82Y30/00;B82Y40/00;G01N21/64
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• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明提供了一種硅納米粒子/金納米簇比率熒光探針的合成方法：首先采用水熱還原法制備氨基保護(hù)的硅納米粒子；然后采用攪拌還原法制備羧基保護(hù)的金納米簇；最后將硅納米粒子和金納米簇進(jìn)行自組裝，合成比率熒光探針。本發(fā)明室溫下自組裝合成硅納米粒子/金納米簇比率熒光探針，過(guò)程簡(jiǎn)單、易操作、條件溫和、耗時(shí)短。本發(fā)明提供的硅納米粒子/金納米簇比率熒光探針能夠準(zhǔn)確采用比率熒光方法檢測(cè)利福平，將所述硅納米粒子/金納米簇比率熒光探針用于檢測(cè)人血清中的痕量利福平，結(jié)果表明其回收率為97.0%～103.5%，且相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差(RSDs)均低于4%。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及熒光探針技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種硅納米粒子/金納米簇比率熒光探針的合成及其對(duì)利福平比率熒光檢測(cè)的應(yīng)用。

背景技術(shù)

利福平(RIF)，又名利發(fā)霉素、甲哌利福霉素、甲哌力復(fù)霉素、威福仙、仙道倫、力復(fù)平或利米定。化學(xué)名稱為3-[[（4-甲基-1-哌嗪基）亞氨基]甲基]-利福霉索。RIF是一種所屬利福霉素家族的廣譜抗生素藥物，對(duì)結(jié)核桿菌有較強(qiáng)抗菌作用。RIF與依賴DNA的RNA多聚酶的β亞單位牢固結(jié)合，抑制細(xì)菌RNA的合成，防止該酶與DNA連接，從而阻斷RNA轉(zhuǎn)錄過(guò)程，使DNA和蛋白的合成停止。該抗生素對(duì)結(jié)核分枝桿菌和部分非結(jié)核分枝桿菌（包括麻風(fēng)分枝桿菌等）在宿主細(xì)胞內(nèi)外均有明顯的殺菌作用。RIF對(duì)需氧革蘭陽(yáng)性菌具有良好抗菌作用，包括葡萄球菌產(chǎn)酶株及甲氧西林耐藥株、肺炎鏈球菌、其他鏈球菌屬、腸球菌屬、李斯特菌屬、炭疽桿菌、產(chǎn)氣莢膜桿菌、白喉?xiàng)U菌、厭氧球菌等。然而RIF作為結(jié)核病的有效藥物，長(zhǎng)期服用也會(huì)對(duì)人體肝腎功能造成損傷，過(guò)量服用RIF會(huì)引起精神遲鈍和各類皮膚綜合癥。有原發(fā)肝病者，酗酒者或同服其他肝毒性藥物者可能引起死亡。RIF在人體內(nèi)的運(yùn)輸主要依賴于血液中的血清蛋白，所以開發(fā)在人血清中能夠高選擇性、高靈敏度檢測(cè)RIF的方法是十分必要的。

目前檢測(cè)RIF痕量的方法主要有高效液相色譜法、電化學(xué)法、核磁共振波譜法和分光光度法。但是這些方法大多需要昂貴的設(shè)備或者是需要大量時(shí)間來(lái)進(jìn)行前期準(zhǔn)備工作。目前熒光檢測(cè)技術(shù)具有選擇性好、靈敏度高、易操作、經(jīng)濟(jì)實(shí)用等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)被廣泛用于痕量檢測(cè)、熒光標(biāo)記等領(lǐng)域。傳統(tǒng)的熒光探針主要由有機(jī)染料分子構(gòu)成，具有熒光亮度低，光穩(wěn)定性和耐光漂白能力差等缺點(diǎn)，限制了熒光檢測(cè)技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展與應(yīng)用。近年來(lái)出現(xiàn)的納米熒光探針包括熒光硅納米粒子(SiNPs)和金納米簇(AuNCs)等，具有較高的熒光量子產(chǎn)率，良好的光穩(wěn)定性和抗光漂白能力，生物相容性好、合成與修飾簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，成為替代傳統(tǒng)熒光探針的新型熒光探針。目前納米熒光探針在檢測(cè)過(guò)程中，通?；趩我粺晒鈴?qiáng)度變化，這種方法易受到檢測(cè)儀器以及測(cè)試環(huán)境的干擾。具有比率熒光特性的新型納米比率熒光探針采用基于兩種不同發(fā)射波長(zhǎng)的熒光強(qiáng)度比值對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行檢測(cè)，利用比率熒光的自校準(zhǔn)作用能夠有效排除所述外部干擾因素。因此采用比率熒光探針可以更加準(zhǔn)確地對(duì)人血清中RIF進(jìn)行痕量檢測(cè)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的在于提供一種硅納米粒子/金納米簇（SiNPs/AuNCs）比率熒光探針的合成及其對(duì)RIF比率熒光檢測(cè)的應(yīng)用。本發(fā)明中比率熒光探針由兩部分組成，分別為氨基保護(hù)的硅納米粒子（SiNPs）和羧基保護(hù)的金納米簇（AuNCs）。本發(fā)明中比率熒光探針直接通過(guò)具有不同發(fā)射波長(zhǎng)的SiNPs與AuNCs進(jìn)行自組裝實(shí)現(xiàn)，過(guò)程簡(jiǎn)單、易操作，條件溫和、耗時(shí)短；制備得到的SiNPs/AuNCs比率熒光探針能夠通過(guò)比率熒光方法應(yīng)用于RIF的痕量檢測(cè)。

為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：

本發(fā)明提供了一種SiNPs/AuNCs比率熒光探針的合成方法，包括以下步驟。

（1）采用水熱法制備氨基保護(hù)的SiNPs

（a）將水溶性硅源、還原劑和水混合，得到初混物；

（b）將所述步驟（a）中初混物在室溫下攪拌10～20 min，得到反應(yīng)前驅(qū)體；