[發(fā)明專利]一種高生物活性細(xì)胞膜仿生微囊泡及其制備方法與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811073228.8
• 申請(qǐng)日: 2018-09-14
• 公開（公告）號(hào): CN109136189B
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 譚蔚泓;劉巧玲;劉學(xué)嬌;畢成
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 湖南大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N5/09
• 分類號(hào): C12N5/09;C12N5/071
• 代理公司: 長沙楚為知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 43217
• 代理人: 陶祥琲

1.一種高生物活性細(xì)胞膜仿生微囊泡的制備方法，其特征在于，具體是一種將貼壁細(xì)胞與納米材料孵育后，置于生物相容性緩沖液中并于白光光源光照下，制備高生物活性細(xì)胞膜仿生微囊泡的方法，具體包括如下步驟：

S1、加樣：將培養(yǎng)貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基吸凈，然后采用DPBS緩沖液或PBS緩沖液清洗貼壁細(xì)胞，接著加入細(xì)胞培養(yǎng)基，細(xì)胞培養(yǎng)基的加入量以每100萬貼壁細(xì)胞2～4ml計(jì)，然后再向培養(yǎng)皿中按每毫升細(xì)胞培養(yǎng)基加入8～15 μL的納米材料，搖勻；

所述貼壁細(xì)胞包括腫瘤細(xì)胞和非腫瘤細(xì)胞；所述納米材料為富勒烯酸衍生物；所述富勒烯酸衍生物為二加成的C70富勒烯丙二酸二乙酯的水解產(chǎn)物納米顆粒、三加成的C70富勒烯丙二酸二乙酯的水解產(chǎn)物納米顆粒；

S2、孵育：將混勻好的培養(yǎng)皿放入37 ℃培養(yǎng)箱中孵育2～4 h；

S3、換液：待步驟S2的納米材料與貼壁細(xì)胞孵育完成后，吸凈培養(yǎng)皿中的培養(yǎng)基，然后采用DPBS緩沖液或PBS緩沖液清洗貼壁細(xì)胞，再加入生物相容性緩沖液，生物相容性緩沖液的加入量以每100萬貼壁細(xì)胞2～4ml計(jì)；所述生物相容性緩沖液為1640培養(yǎng)基、DPBS緩沖液、PBS緩沖液、HEPES緩沖液中的任意一種；

S4、光照：將步驟S3更換完培養(yǎng)基的貼壁細(xì)胞置于白光光源下光照30～90min；白光光源的波長為400～700 nm；

S5、靜置：將光照完成后的貼壁細(xì)胞放于避光的環(huán)境下靜置5～14h，收集培養(yǎng)皿中的溶液即可獲得細(xì)胞膜仿生微囊泡。

2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的高生物活性細(xì)胞膜仿生微囊泡的制備方法，其特征在于，所述腫瘤細(xì)胞為Hep G2細(xì)胞、HeLa細(xì)胞。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高生物活性細(xì)胞膜仿生微囊泡的制備方法，其特征在于，所述非腫瘤細(xì)胞為LO2細(xì)胞。

4.權(quán)利要求1～3任意一項(xiàng)所述的高生物活性細(xì)胞膜仿生微囊泡的制備方法在構(gòu)建細(xì)胞仿生模型中的應(yīng)用。