[發(fā)明專利]咖啡因作為酪氨酸酶抑制劑的用途

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811068247.1
• 申請(qǐng)日: 2018-09-13
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109288844A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-02-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 杜希萍;孫旭;楊遠(yuǎn)帆;倪輝;姜澤東;黃高凌;李利君;朱艷冰;肖安風(fēng);楊秋明;陳艷紅;伍菱;胡陽(yáng)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 集美大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K31/522
• 分類號(hào): A61K31/522;A61P17/00;A61P17/18;A61Q19/00;A61Q19/02;A23L33/105
• 代理公司: 廈門創(chuàng)象知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 35232
• 代理人: 尤懷成

1.咖啡因作為酪氨酸酶抑制劑的用途，其特征在于：以咖啡因作為活性成分之一或唯一活性成分用于制備酪氨酸酶抑制劑。

2.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于：所述咖啡因?qū)野彼崦妇哂幸种谱饔谩?/p>

3.如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于：所述咖啡因是從茶花粉中分離純化而制得的。

4.如權(quán)利要求3所述的用途，其特征在于：所述咖啡因分離純化包括以下步驟：

S1、提取：取茶花粉，加入乙醇，于水浴中浸提，共提取3次，抽濾，合并濾液，并減壓濃縮成浸膏，得粗提物；

S2、萃?。捍痔嵛锛尤胝麴s水，攪拌溶解，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，均萃取3次，而后將它們分別減壓濃縮，得石油醚相、乙酸乙酯相及正丁醇相；

S3、大孔吸附樹(shù)脂層析：取乙酸乙酯相，加入蒸餾水復(fù)溶，振蕩離心12 min，取上清液加入大孔樹(shù)脂中，大孔樹(shù)脂置于搖床中吸附16 h，將吸附后的大孔樹(shù)脂裝柱，使用不同濃度的乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，洗脫體積均為5個(gè)柱體積，收集各洗脫組分，獲得大孔樹(shù)脂乙醇洗脫相；

S4、酸解：取大孔樹(shù)脂乙醇洗脫相，加入無(wú)水乙醇，而后再加入等體積4 M的鹽酸，于90°C水浴中酸水解90 min，將酸解液減壓蒸干，獲得大孔樹(shù)脂乙醇洗脫相酸解物；

S5、HSCCC制備分離：配置正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水溶液體系，體積比為4:6:4:6，充分震蕩，靜置分層，分別收集上相和下相溶液，超聲脫氣，上相為固定相，下相為流動(dòng)相，將固定相按照一定的流速泵滿色譜柱后，調(diào)節(jié)高速逆流色譜轉(zhuǎn)速至850 rpm，并將流動(dòng)相按照一定的流速泵入色譜柱中；兩相達(dá)平衡后，將樣品溶液從進(jìn)樣環(huán)注入高速逆流色譜管路，樣品溶液為步驟S4獲得的大孔樹(shù)脂乙醇洗脫相酸解物，同時(shí)通過(guò)紫外檢測(cè)器檢測(cè)流出組分，紫外檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)置為280 nm，根據(jù)峰形收集各組分；

S6、半制備型高效液相純化：將步驟S5收集到的組分按順序編號(hào)，以咖啡因標(biāo)準(zhǔn)品作為對(duì)照，進(jìn)行高效液相色譜分析，選擇與咖啡因標(biāo)準(zhǔn)品峰保留時(shí)間一致的樣品作為研究對(duì)象進(jìn)行半制備型高效液相純化，其上樣條件為：質(zhì)量濃度為5 mg/mL -20 mg/mL，進(jìn)樣體積為10 μL-200 μL，根據(jù)峰形收集各組分，進(jìn)行高效液相色譜分析，篩選出目標(biāo)組分；

S7、結(jié)構(gòu)鑒定：目標(biāo)組分利用高效液相色譜、核磁共振、質(zhì)譜的方法進(jìn)行鑒定，即可確定目標(biāo)組分為咖啡因；

S8、純度測(cè)定：將S7中的目標(biāo)組分利用高效液相色譜進(jìn)行測(cè)定，按照峰面積歸一法確定其純度。

5.咖啡因作為酪氨酸酶抑制劑的用途，其特征在于：以咖啡因作為活性成分之一或唯一活性成分用于制備皮膚美白或/和祛斑的化妝品。

6.咖啡因作為酪氨酸酶抑制劑的用途，其特征在于：以咖啡因作為活性成分之一或唯一活性成分用于制備抑制黑色素生成的藥物或/和保健食品。