[發明專利]一種嵌合共刺激轉換受體、編碼基因、重組表達載體、抗腫瘤NK細胞及其制備方法、應用有效
| 申請號： | 201811068231.0 | 申請日： | 2018-09-13 |
| 公開（公告）號： | CN109096404B | 公開（公告）日： | 2020-05-19 |
| 發明（設計）人： | 朱武凌;李明風;王曉銀;呂探宇;路臣桂;張會勇;牛志遠;郭長江 | 申請（專利權）人： | 新鄉醫學院 |
| 主分類號： | C07K19/00 | 分類號： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/867;C12N5/10;A61K35/17;A61P35/00 |
| 代理公司： | 鄭州睿信知識產權代理有限公司 41119 | 代理人： | 李寧 |
| 地址： | 453003*** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 嵌合 刺激 轉換 受體 編碼 基因 重組 表達 載體 腫瘤 nk 細胞 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種嵌合共刺激轉換受體，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，是由PD1胞外段，DAP10胞外、跨膜及胞內段以及共刺激分子41BB胞內段組成。
2.一種嵌合共刺激轉換受體的編碼基因，其特征在于：所述編碼基因編碼的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
3.根據權利要求2所述的嵌合共刺激轉換受體的編碼基因，其特征在于：其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
4.一種包含嵌合共刺激轉換受體編碼基因的重組表達載體，其特征在于：其包含嵌合共刺激轉換受體編碼基因，所述嵌合共刺激轉換受體編碼基因編碼的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示。
5.根據權利要求4所述的包含嵌合共刺激轉換受體編碼基因的重組表達載體，其特征在于：所述嵌合共刺激轉換受體編碼基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
6.如權利要求4所述的包含嵌合共刺激轉換受體編碼基因的重組表達載體的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：1）合成所述嵌合共刺激轉換受體編碼基因；2）將所述嵌合共刺激轉換受體編碼基因連接到慢病毒表達載體上，即得。
7.一種高細胞毒性的抗腫瘤NK細胞，其特征在于：其為經嵌合共刺激轉換受體改造的NK細胞，所述嵌合共刺激轉換受體的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
8.如權利要求7所述的高細胞毒性的抗腫瘤NK細胞的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：
1）合成所述嵌合共刺激轉換受體編碼基因；2）將所述嵌合共刺激轉換受體編碼基因連接到慢病毒表達載體上，得重組慢病毒表達載體；3）包裝所述重組慢病毒表達載體，表達出攜帶目的質粒的病毒；4）將所述攜帶目的質粒的病毒侵染NK92細胞，即得。
9.如權利要求1所述的嵌合共刺激轉換受體或權利要求2-3任一項所述的嵌合共刺激轉換受體的編碼基因在制備抗腫瘤藥物中的應用。
10.如權利要求4-5任一項所述的包含嵌合共刺激轉換受體編碼基因的重組表達載體或權利要求7所述的高細胞毒性的抗腫瘤NK細胞在制備抗腫瘤藥物中的應用。
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