[發明專利]用于檢測草魚出血病毒的特異性引物對、探針、檢測試劑盒在審
| 申請號： | 201811067067.1 | 申請日： | 2018-09-13 |
| 公開（公告）號： | CN109182599A | 公開（公告）日： | 2019-01-11 |
| 發明（設計）人： | 袁銳;高山珊;王晶晶;貢成良;于繼彬 | 申請（專利權）人： | 江蘇省漁業技術推廣中心;蘇州先達基因科技有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/6816 |
| 代理公司： | 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 王艷 |
| 地址： | 210000 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 檢測 出血病毒 草魚 特異性引物 恒溫擴增 探針 引物 假陽性結果 保守基因 產物電泳 檢測試劑 探針組合 驗證過程 儀器設備 準確度 便捷性 試劑盒 種檢測 準確率 靶點 節約 | ||
1.一種用于檢測草魚出血病毒的特異性引物對，其特征在于，所述引物對包括上游引物和下游引物，所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：3或SEQ ID NO：5或SEQ ID NO：7所示，所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：2 或SEQ ID NO：4 或SEQID NO：6或SEQ ID NO：8所示。
2.與權利要求1所述的引物對配合使用的探針，其特征在于，所述探針的核苷酸序列如SEQ ID NO：9 或SEQ ID NO：10或SEQ ID NO：11所示。
3.根據權利要求2所述的探針，其特征在于，所述探針為熒光染料標記的探針，所述熒光染料為SYTO-13，SYTO-82， FAM，FITC, SYBR Green I，SYTO-13，SYTO-82，VIC，HEX，JOE，TAMRA，TET，Cy3 ，ROX，TEXAS-Red或Cy5中的一種。
4.權利要求1所述的特異性引物對、權利要求2所述的探針在制備草魚出血病毒檢測或診斷試劑盒中的應用。
5.一種草魚出血病毒的檢測試劑盒，其特征在于，所述草魚出血病毒的檢測試劑盒包括權利要求1所述的引物對和/或權利要求2~3任一項所述的探針。
6.根據權利要求5所述的草魚出血病毒的檢測試劑盒，其特征在于，所述的檢測試劑盒反應體系包括：重組酶，聚合酶，單鏈DNA結合蛋白，核酸酶，至少一對引物，一條探針，dNTP、擁擠試劑、重組加載蛋白、能量系統和鹽離子。
7.根據權利要求6所述的草魚出血病毒的檢測試劑盒，其特征在于，所述重組酶選自噬菌體UvsX 蛋白，大腸桿菌recA蛋白的任一種或一種以上的組合。
8.根據權利要求6所述的草魚出血病毒的檢測試劑盒，其特征在于，所述核酸酶選自核酸外切酶III，核酸內切酶IV的任一種或一種以上的組合。
9.根據權利要求6所述的草魚出血病毒的檢測試劑盒，其特征在于，所述擁擠試劑為聚乙二醇，所述聚乙二醇選自PEG1450，PEG3000，PEG8000，PEG10000，PEG14000， PEG20000，PEG25000，PEG30000，PEG35000或PEG40000中的一種或幾種。
10.根據權利要求7所述的草魚出血病毒的檢測試劑盒，其特征在于，所述能量系統選自ATP、磷酸肌酸、肌酸激酶的一種或一種以上的組合。
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