[發(fā)明專利]一種細(xì)胞濃縮補(bǔ)料培養(yǎng)工藝

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811065813.3
• 申請(qǐng)日: 2018-09-12
• 公開（公告）號(hào): CN109134645A
• 公開（公告）日: 2019-01-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 肖尚;翁源燦;陳浩帆;葉慶妮
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 深圳市菲鵬生物制藥股份有限公司
• 主分類號(hào): C07K16/00
• 分類號(hào): C07K16/00;C12N5/20;C12N5/10
• 代理公司: 北京超凡志成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11371
• 代理人: 逯恒

1.一種細(xì)胞濃縮補(bǔ)料培養(yǎng)工藝，其特征在于，細(xì)胞培養(yǎng)過程進(jìn)行補(bǔ)液和換液，其中，換液過程中，僅細(xì)胞被截留，目標(biāo)產(chǎn)物隨液體排出。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞濃縮補(bǔ)料培養(yǎng)工藝，其特征在于，所述細(xì)胞培養(yǎng)過程進(jìn)行補(bǔ)液和換液的步驟為：

細(xì)胞接種培養(yǎng)第2-3天，補(bǔ)液，第3-6天換液和補(bǔ)液，以后每天進(jìn)行換液和補(bǔ)液的操作。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞濃縮補(bǔ)料培養(yǎng)工藝，其特征在于，所述細(xì)胞接種至生產(chǎn)設(shè)備中培養(yǎng)，所述生產(chǎn)設(shè)備包括方瓶、搖瓶、反應(yīng)器；

進(jìn)一步地，所述接種的密度為1×10⁵cells/mL至9×10⁶cells/mL。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞濃縮補(bǔ)料培養(yǎng)工藝，其特征在于，所述補(bǔ)液體積均為初始培養(yǎng)體積的3％±0.5％。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞濃縮補(bǔ)料培養(yǎng)工藝，其特征在于，所述細(xì)胞截留包括以下方式：離心、中空纖維膜截留或切向流技術(shù)。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞濃縮補(bǔ)料培養(yǎng)工藝，其特征在于，所述目標(biāo)產(chǎn)物包括以下中的任一種處理方式：

在無(wú)菌處理方式下將排出的液體儲(chǔ)存在2-8℃條件下；

排出的液體濃縮之后無(wú)菌過濾后存儲(chǔ)在4-8℃。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的細(xì)胞濃縮補(bǔ)料培養(yǎng)工藝，其特征在于，所述細(xì)胞為雜交瘤細(xì)胞、攜帶外源表達(dá)載體的中華倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞；

進(jìn)一步地，所述目標(biāo)產(chǎn)物包括抗原、抗體；

進(jìn)一步地，所述抗原包括HBsAg；

進(jìn)一步地，所述抗體包括與登革熱適配的抗體、PD-1抗體。

8.根據(jù)權(quán)利要求求7所述的細(xì)胞濃縮補(bǔ)料培養(yǎng)工藝，其特征在于，所述細(xì)胞為雜交瘤細(xì)胞或表達(dá)HBsAg的中華倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞，所述補(bǔ)料所用的溶液均為100g/L的水解乳蛋白；

所述細(xì)胞為表達(dá)PD-1抗體的中華倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞，所述補(bǔ)料所用的溶液為Efficientfeed^TM C+；

進(jìn)一步地，細(xì)胞培養(yǎng)的整個(gè)過程中控制葡萄糖濃度在1-6g/L之間。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的細(xì)胞濃縮補(bǔ)料培養(yǎng)工藝，其特征在于，細(xì)胞培養(yǎng)的總時(shí)間為7-15天。

10.根據(jù)權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)所述的細(xì)胞濃縮補(bǔ)料培養(yǎng)工藝，其特征在于，所述收集的液體還包括分離和純化的步驟，得到目標(biāo)產(chǎn)物；

進(jìn)一步地，所述分離依次采用離心和濾膜的方式進(jìn)行。