[發明專利]β2-MG化學發光免疫分析測定試劑盒及其制備方法

在審

• 申請號: 201811061298.1
• 申請日: 2018-09-12
• 公開（公告）號: CN109239359A
• 公開（公告）日: 2019-01-18
• 發明（設計）人: 劉楊;翟濤;高威;孫成艷;何浩會
• 申請（專利權）人: 迪瑞醫療科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/543;G01N33/553;G01N33/58;G01N33/532;G01N21/76
• 代理公司: 長春眾邦菁華知識產權代理有限公司 22214
• 代理人: 劉微

本發明公開了一種β2?MG化學發光免疫分析測定試劑盒及其制備方法，屬于免疫分析的技術領域，解決現有技術靈敏度低、成本高等問題。該試劑盒包括以下試劑：R1：含有鏈霉親和素包被的磁珠的液體；R2：含有吖啶酯標記的β2?MG抗體的液體；R3：含有生物素標記的β2?MG抗體的液體。本發明的β2?MG化學發光免疫分析測定試劑盒具有檢測靈敏度高、特異性強、重復性好、檢測范圍廣、穩定性好等優點，可廣泛用于β2?MG的臨床檢測。

技術領域

本發明涉及免疫分析的技術領域，尤其涉及一種β2-MG化學發光免疫分析測定試劑盒及其制備方法。

背景技術

β2-微球蛋白(簡稱β2-MG)是由Berggard和Bearn于1968年從腎臟患者尿中分離出的一種蛋白質，由于它的分子量為11800，電泳時顯于β2區帶，故被命名為β2-微球蛋白。β2-MG是人體有核細胞產生的一種由100個氨基酸殘基組成的單鏈多肽低分子蛋白。β2-MG與人類白細胞抗原(HLA)的輕鏈部分相同，鏈內含有一對二硫鍵，β2-MG與HLA-A、B、C抗原的重鏈非共價的相結合而存在于細胞膜上。一般認為除成熟紅細胞和胎盤滋養層細胞外，其它細胞均含有β2-MG。因此，起源于人體間質細胞上皮和造血系統的正常細胞和惡性細胞均能合成β2-MG。它可從有核細胞中脫落進入血循環，使血液中的β2-MG升高。

血、尿β2-MG不僅可對腎臟疾病的臨床診斷起輔助作用，還可作為腎臟損害程度的指標。正常情況下β2-MG在血液、尿液中含量都很少，血液中β2-MG經腎小球過濾后99.9％被近端小管重吸收。但在發生急、慢性腎炎，腎功能衰竭，腎移植后發生排斥反應等腎臟疾病時β2-MG水平升高。故測定血液β2-MG可作為腎小球濾過率的指標，主要的臨床應用在于監測腎小管功能。當血液β2-MG水平上升，可反映腎小球濾過功能下降或體內合成增加，尿液中β2-MG升高，可反映腎小管功能受損和腎小球濾過率增加。此外，據文獻報道，多種血液系統及實體性腫瘤患者β2-微球蛋白含量也可異常增高，在淋巴系統中如慢性淋巴細胞白血病、淋巴細胞肉瘤、多發性骨髓瘤等中尤為明顯；在肺癌、乳腺癌、胃腸道癌及子宮頸癌等惡性腫瘤患者體內也可見增高。另外，類風濕關節炎，系統性紅斑狼瘡，肝炎等患者β2-MG水平也可升高。

目前用于檢測β2-MG的免疫分析方法主要有酶聯免疫分析法和化學發光免疫分析法。酶聯免疫分析法采用辣根過氧化物酶或堿性磷酸酶標記抗體，用于催化發光底物產生顏色變化，操作簡單，但是標記物易失活，發光底物需要避光，試劑的檢測靈敏度較低，導致測試結果不準確。化學發光免疫分析法采用催化劑催化化學發光物質形成一種激發態中間體，當激發態中間體回到穩定的基態時，發出光子，具有操作簡單，自動化程度高，檢測速度快等優點。以上定量檢測β2-MG的方法存在以下缺陷：1)ELISA方法采用微孔板作為固定性，包被密度有限，靈敏度較低，反應時間較長；2)采用異魯米諾衍生物直接標記抗體，采用FITC抗體-FITC將FER抗體間接偶聯至磁珠表面，引入更多的影響因素，影響結果的檢測。

發明內容

本發明針對上述技術問題，提供一種β2-MG化學發光免疫分析測定試劑盒及其制備方法，該試劑盒用于定量檢測人血清/尿液中的β2-MG含量，具有靈敏度高，操作簡單，成本低等優點。

為了實現上述目的，本發明提供如下技術方案：

β2-MG化學發光免疫分析測定試劑盒，包括以下試劑：

R1：含有鏈霉親和素包被的磁珠的液體；

R2：含有吖啶酯標記的β2-MG抗體的液體；

R3：含有生物素標記的β2-MG抗體的液體；

其中，R1中鏈霉親和素包被的磁珠的濃度為0.05％-0.1％；

R2中β2-MG抗體與吖啶酯的摩爾比為1:3-1:15；吖啶酯標記的β2-MG抗體的濃度為0.1-0.5μg/ml；