[發(fā)明專利]β2-MG化學(xué)發(fā)光免疫分析測定試劑盒及其制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811061298.1
• 申請日: 2018-09-12
• 公開（公告）號: CN109239359A
• 公開（公告）日: 2019-01-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉楊;翟濤;高威;孫成艷;何浩會
• 申請（專利權(quán)）人: 迪瑞醫(yī)療科技股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/543;G01N33/553;G01N33/58;G01N33/532;G01N21/76
• 代理公司: 長春眾邦菁華知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 22214
• 代理人: 劉微

1.β2-MG化學(xué)發(fā)光免疫分析測定試劑盒，其特征在于，包括以下試劑：

R1：含有鏈霉親和素包被的磁珠的液體；

R2：含有吖啶酯標記的β2-MG抗體的液體；

R3：含有生物素標記的β2-MG抗體的液體；

其中，R1中鏈霉親和素包被的磁珠的濃度為0.05％-0.1％；

R2中β2-MG抗體與吖啶酯的摩爾比為1:3-1:15；吖啶酯標記的β2-MG抗體的濃度為0.1-0.5μg/ml；

R3中β2-MG抗體與生物素的摩爾比為1:3-1:15；生物素標記的β2-MG抗體的濃度為0.5-3μg/ml；

R1緩沖液的pH值為7.0-8.0，R2和R3緩沖液的pH值均為6.0-6.8。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的β2-MG化學(xué)發(fā)光免疫分析測定試劑盒，其特征在于，還包括兩點企業(yè)校準品，校準品中含有β2-MG的濃度分別為0.1mg/L和2mg/L。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的β2-MG化學(xué)發(fā)光免疫分析測定試劑盒，其特征在于，校準品的緩沖液為含有20％小牛血清的100mM PBS緩沖液。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的β2-MG化學(xué)發(fā)光免疫分析測定試劑盒，其特征在于，R1的制備方法為：取濃度為100mg/ml的鏈霉親和素磁顆粒溶液，加入20倍體積的TBST溶液充分混勻10分鐘后，放置于磁分離器上，直至上清無混濁，棄上清，留取磁顆粒；重復(fù)清洗3次后用含有0.05％吐溫和0.02％疊氮鈉、pH7.0-8.0的25mM Tris緩沖液配成磁珠濃度為0.05％-0.1％的固相試劑R1。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的β2-MG化學(xué)發(fā)光免疫分析測定試劑盒，其特征在于，R2的制備方法為：將β2-MG抗體加入50mM-200mM PBS緩沖溶液，將β2-MG抗體與吖啶酯按摩爾體積比1:3-1:15混合，充分混勻；室溫放置2-4小時后，加入1mL 20％賴氨酸的封閉液，混勻，封閉時間為1h；封閉后對吖啶酯標記抗體溶液進行純化，收取純化后溶液，用含有0.05％吐溫、pH6.0-6.8的400mM Bistris緩沖液稀釋至終濃度為0.1-0.5μg/ml的試劑R2。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的β2-MG化學(xué)發(fā)光免疫分析測定試劑盒，其特征在于，R3的制備方法為：將β2-MG抗體加入50mM-200mM PBS緩沖溶液，將β2-MG抗體與生物素按摩爾體積比1:3-1:15混合，充分混勻，室溫放置2-4小時后，對生物素標記抗體溶液進行純化，收取純化后溶液，用含有1％BSA、pH6.0-6.8的400mM Bistris緩沖液將純化后的抗體配制成終濃度為0.5-3μg/ml的試劑R3。

7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的β2-MG化學(xué)發(fā)光免疫分析測定試劑盒，其特征在于，純化步驟采用的是AKTA蛋白純化儀。