[發明專利]固定化酶催化法制備D-赤蘚酮糖的方法

有效

• 申請號: 201811054510.1
• 申請日: 2018-09-11
• 公開（公告）號: CN109251948B
• 公開（公告）日: 2019-10-08
• 發明（設計）人: 黃華;高睿迪
• 申請（專利權）人: 華南師范大學
• 主分類號: C12P19/02
• 分類號: C12P19/02;C12R1/19
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 郭煒綿

本發明公開了一種利用固定化酶連續催化赤藻糖醇制備D?赤蘚酮糖的方法，該方法包括以下步驟：擴增EDH、EuK、LDH、PPK、AP基因，連接質粒并轉入細胞，誘導蛋白表達后將細胞破碎離心分離純化后得到5種酶，將酶固定化；取相應的酶解底物，加入固定化混合酶，反應生成D?赤蘚酮糖?4?磷酸，純化后得到D?赤蘚酮糖?4?磷酸鈉；將該底物與固定化磷酸水解酶AP反應，最終制得D?赤蘚酮糖。本發明方法利用丁醇糖氧化酶和羥基丙酮激酶的連續反應，實現了廉價的赤藻糖醇到D?赤蘚酮糖?4?磷酸的一次性完全轉化，進而可以很方便地利用磷酸水解酶脫磷酸生成D?赤蘚酮糖。反應不會生成類似結構的產物，純度和收率都得到了保證。

技術領域

本發明涉及D-赤蘚酮糖的制備方法，具體涉及一種利用固定化酶連續催化赤藻糖醇制備D-赤蘚酮糖的方法。

背景技術

D-赤蘚酮糖(D-erythrulose)是一種四碳酮糖，分子式為C₄H₈O₄，分子量為120，是存在于紅漿果(常見于木莓)里一種呈黃色到紅色的糖，由于該糖能與表皮死細胞膜表面蛋白氨基酸作用生成褐色色澤(brownish tint)，因而被廣泛應用作安全、無毒的皮膚染料。

D-赤蘚酮糖常與二羥基丙酮(Dihydroxyacetone)混合應用于皮膚著色，產品通常以DHA/E調和染色標注(如：Tanfastic、Veneto等產品)。赤蘚酮糖色調與二羥基丙酮略有區別，能使皮膚顏色更紅、更熱情。然而其昂貴的價格一直嚴重制約其進一步推廣應用(參考價格表)，因而開發一種方便的、能大量制備赤蘚酮糖的方法以降低其成本變得非常重要。

各種相關化合物價格表：

化合物名	CAS number	公司	價格($)
D-蘇糖(D-threose)	95-43-2	Carbosynth	350/克
L-蘇糖(L-threose)	95-44-3	Carbosynth	1000/克
D-赤蘚糖(D-erythrose)	583-50-6	Carbosynth	55/克
L-赤蘚糖(L-erythrose)	533-49-3	Carbosynth	420/克
赤藻糖醇(meso-erythritol)	149-32-6	Carbosynth	95/公斤
D-蘇糖醇(D-threitol)	2418-52-2	Carbosynth	450/克
L-蘇糖醇(L-threitol)	2319-57-5	Carbosynth	200/克
L-赤蘚酮糖(L-erythrulose)	533-50-6	Carbosynth	1200/公斤
D-赤蘚酮糖(D-erythrulose)	496-55-9	Carbosynth	2600/克