[發(fā)明專利]一種干細(xì)胞外泌體、制備方法及應(yīng)用

在審

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• 申請日: 2018-09-07
• 公開（公告）號: CN109097336A
• 公開（公告）日: 2018-12-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 刁波;張宜;劉瑩;楊前;王剛;陳力;袁紫林;林虹;羅青云;袁賢玲
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳市新一侖生物科技有限公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N15/85;A61K8/98;A61Q19/00
• 代理公司: 武漢今天智匯專利代理事務(wù)所(普通合伙) 42228
• 代理人: 鄧寅杰

本發(fā)明提供一種干細(xì)胞外泌體、制備方法及應(yīng)用，首先對用戶肌膚問題進(jìn)行關(guān)于皮膚的基因檢測，根據(jù)基因檢測的結(jié)果，尋找到改善其肌膚問題的目的基因，通過體外合成手段對所述目的基因進(jìn)行擴(kuò)增，然后將目的基因轉(zhuǎn)至載體制備成靶基因載體，將所述靶基因載體轉(zhuǎn)染進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞得到靶基因間充質(zhì)干細(xì)胞，最后將所述靶基因間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，收集其細(xì)胞培養(yǎng)液，提取所述細(xì)胞培養(yǎng)液中的外泌體，將提取好的外泌體進(jìn)行滅菌、定量后分裝保存；與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果在于從基因根源入手，修復(fù)問題基因從而有效改善肌膚問題，緩解“內(nèi)部老化”。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及干細(xì)胞領(lǐng)域，具體涉及一種干細(xì)胞外泌體、制備方法及應(yīng)用。

背景技術(shù)

MSC是目前研究最多的干細(xì)胞，目前許多臨床試驗(yàn)以證實(shí)MSC能夠治療多種疾病，并且具有較好效果，同時(shí)MSC具有更強(qiáng)的安全性，且在不同酸堿環(huán)境、缺氧、高溫、反復(fù)凍融等惡劣條件下仍能保持較高穩(wěn)定性，用其制成的功能性美容產(chǎn)品能夠最大限度的保持細(xì)胞再生因子的活性和功能，現(xiàn)今干細(xì)胞外泌體護(hù)膚產(chǎn)品的研究已有很多，大都是利用其外泌體的活性使肌膚狀況改善。

然而，肌膚問題多種多樣，用戶需求也多種多樣，抗衰、美白、抗敏等等，但是造成肌膚問題的原因則是由許多因素，例如陽光暴露、空氣污染、吸煙、酗酒、營養(yǎng)不良、不健康飲食、慢性疾病等環(huán)境性因素，另一種則是有我們自身的遺傳基因調(diào)控，無論是衰老、黑色素沉積還是過敏性肌膚，與相關(guān)基因的表達(dá)活性有很大關(guān)系。

現(xiàn)今護(hù)膚品大都是從防護(hù)著手，改善或修復(fù)外部環(huán)境帶來的損傷，無法從根源解決基因問題帶來的肌膚問題。

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種干細(xì)胞外泌體、制備方法及應(yīng)用。

具體技術(shù)方案如下：

一種干細(xì)胞外泌體，其不同之處在于，所述干細(xì)胞外泌體由含有改善皮膚的靶基因載體的間充質(zhì)干細(xì)胞分泌，所述靶基因載體包括KIF3A、OVOL1、SOD1、COL5A1、MC1R、TYR、GHRHR、EDAR、FLG、MMP9、XRCC1、RAD51、HBE1或KL中的一種或多種基因。

一種制備上述干細(xì)胞外泌體方法，其不同之處在于，首先對用戶肌膚問題進(jìn)行關(guān)于皮膚的基因檢測，根據(jù)基因檢測的結(jié)果，尋找到改善其肌膚問題的目的基因，通過體外合成手段對所述目的基因進(jìn)行擴(kuò)增，然后將目的基因轉(zhuǎn)至載體制備成靶基因載體，將所述靶基因載體轉(zhuǎn)染進(jìn)間充質(zhì)干細(xì)胞得到靶基因間充質(zhì)干細(xì)胞，最后將所述靶基因間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，收集其細(xì)胞培養(yǎng)液，提取所述細(xì)胞培養(yǎng)液中的外泌體，將提取好的外泌體進(jìn)行滅菌、定量后分裝保存；

所述測試的基因如下中的一種或多種基因組合：

與青春痘形成的相關(guān)基因組合：EDAR、CYP21A2、KIF3A、OVOL1、ATP2A2；

皮膚防曬能力的相關(guān)基因組合：MC1R、OCA2、SOD1、CYP21A2、KIF3A、OVOL1；

皮膚抗敏性的相關(guān)基因組合：COL5A1、MC1R、KIF3A、OVOL1、SOD1；

與雀斑黑色素形成相關(guān)的基因組合：MC1R、OCA2、BNC2、TYR；

抗皺能力的相關(guān)的基因組合：SOD1、GHRHR、EDAR、FLG、MC1R、MMP9；

與皮膚防輻射能力及抗衰老能力相關(guān)的基因組合：XRCC1、RAD51、HBE1、MMP9、SOD1、CHRHR、KL。

上述技術(shù)方案中，所述目的基因包括KIF3A、OVOL1、SOD1、COL5A1、MC1R、TYR、GHRHR、EDAR、FLG、MMP9、XRCC1、RAD51、HBE1或KL中的一種或多種。

上述技術(shù)方案中，所述干細(xì)胞外泌體制備方法包括以下步驟：