[發明專利]一種整合型酵母重組表達系統及使用方法在審
| 申請號： | 201811048701.7 | 申請日： | 2018-09-10 |
| 公開（公告）號： | CN109266564A | 公開（公告）日： | 2019-01-25 |
| 發明（設計）人： | 華權高;沈鶴霄;李昆鵬;鄧文鵬;田甜甜;杜麗娜 | 申請（專利權）人： | 武漢金開瑞生物工程有限公司 |
| 主分類號： | C12N1/19 | 分類號： | C12N1/19;C12N15/81;C12R1/865;C12R1/85 |
| 代理公司： | 北京眾達德權知識產權代理有限公司 11570 | 代理人： | 王俊杰 |
| 地址： | 430206 湖北省武漢市東湖*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 整合 酵母 傳代 重組表達系統 高密度發酵 遺傳 整合型 基因缺陷型 酵母基因組 培養基成本 表達系統 酵母表達 酵母菌株 酵母整合 篩選標記 穩定遺傳 質粒丟失 缺陷型 構建 位點 驗證 轉換 轉化 改造 | ||
1.一種整合型酵母，其特征在于，所述酵母為URA3基因缺陷型，并含表達URA3基因且整合到酵母基因組的載體。
2.如權利要求1所述的酵母，其特征在于，所述載體為整合型質粒載體。
3.如權利要求2所述的酵母，其特征在于，所述整合型質粒載體為表達URA3基因的載體。
4.如權利要求3所述的酵母，其特征在于，所述整合型質粒載體為pYIP5。
5.如權利要求1所述的酵母，其特征在于，所述URA3基因缺陷可以是URA3基因全長或部分的缺失或敲除。
6.如權利要求5所述的酵母，其特征在于，所述缺失或敲除通過同源置換實現。
7.如權利要求1所述的酵母，其特征在于，所述酵母為釀酒酵母或貝酵母。
8.如權利要求1所述的酵母，其特征在于，所述酵母含有能夠穩定遺傳的外源基因。
9.如權利要求8所述的酵母，其特征在于，所述外源基因為PGC3。
10.如權利要求1-9所述的酵母，其特征在于，其外源基因在300代能穩定遺傳。
11.一種酵母表達系統，其包含如權利要求1-9所述的酵母。
12.構建如權利要求1-10所述的酵母或如權利要求11所述酵母表達系統的方法，其特征在于，構建URA3基因缺陷型酵母，將含有URA3基因及外源基因的載體線性化后整合至酵母基因組。
13.穩定表達外源基因的方法，其特征在于，使用如權利要求1-10所述的酵母或如權利要求11所述的酵母表達系統。
14.如權利要求13所述的方法，所述外源基因在300代能穩定遺傳。
15.權利要求1-10所述的酵母或權利要求11所述的酵母表達系統在穩定表達外源基因中的用途。
16.權利要求1-10所述的酵母或權利要求11所述的酵母表達系統在高密度發酵中的用途。
17.權利要求1-10所述的酵母或權利要求11所述的酵母表達系統在釀酒中的用途。
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