[發(fā)明專利]鵝膏毒肽類抗體偶聯(lián)物

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811046475.9
• 申請日: 2018-09-08
• 公開（公告）號: CN109464654B
• 公開（公告）日: 2021-11-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱義;李杰;萬維李;余永國;卓識
• 申請（專利權(quán)）人: 四川百利藥業(yè)有限責(zé)任公司;成都多特抗體藥物有限責(zé)任公司
• 主分類號: A61K38/12
• 分類號: A61K38/12;A61K47/68;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明公開了鵝膏毒肽類抗體偶聯(lián)物，該類化合物以特殊的化學(xué)結(jié)構(gòu)與相應(yīng)的靶結(jié)合基團(tuán)偶聯(lián)，其結(jié)構(gòu)在血漿中穩(wěn)定而在特定的生物環(huán)境中裂解成為活性成份的藥物，以達(dá)到對靶細(xì)胞殺傷性的最大化和對非靶細(xì)胞毒害副作用的最小化，可用于多種惡性腫瘤的治療。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物制藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種鵝膏毒肽類抗體偶聯(lián)物。

背景技術(shù)

鵝膏毒肽(amanitin)是由劇毒蘑菇中分離出來的鵝膏肽類毒素中的一種，為8個(gè)氨基酸組成的雙環(huán)肽，已分離純化的天然鵝膏毒肽有9種，分別是α-鵝膏毒肽、β-鵝膏毒肽、γ-鵝膏毒肽、ε-鵝膏毒肽、鵝膏素(amanin)、三羥毒傘肽酰胺(amaninamide)、鵝膏無毒環(huán)肽(amanullin)、一羥鵝膏毒肽羧酸(amanullinic acid)和前鵝膏無毒環(huán)肽(proamanullin)，其中α-鵝膏毒肽和β-鵝膏毒肽是導(dǎo)致死亡的主要毒素。鵝膏毒肽是一類慢作用毒素，可抑制真核RNA聚合酶II和RNA聚合酶III的轉(zhuǎn)錄，導(dǎo)致蛋白質(zhì)缺失和細(xì)胞死亡。該類毒素對RNA聚合酶II的抑制性極高，KD可達(dá)3nM，在腸胃道中因腸肝循環(huán)而反復(fù)在體內(nèi)被吸收，對人體的肝腎心肺等器官能產(chǎn)生持續(xù)性的嚴(yán)重?fù)p害。

將鵝膏毒肽與大的生物分子載體(如抗體分子)偶聯(lián)后，其毒性大大降低甚至相對無毒，僅在特定生理環(huán)境中生物分子載體被切除之后，鵝膏毒肽才會(huì)顯現(xiàn)其細(xì)胞毒性。

近年來，世界上一些研究機(jī)構(gòu)和公司對鵝膏毒肽分子進(jìn)行了結(jié)構(gòu)改造，以獲得具有藥用價(jià)值的抗體-毒素偶聯(lián)物，例如：德國海德堡醫(yī)藥有限責(zé)任公司將天然鵝膏毒肽分子的1-位、3-δ-位或6’-酚羥基以連接子與單抗偶聯(lián)；美國Agensys公司對α-鵝膏毒肽的吲哚環(huán)上苯基進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾，從6’-酚羥基或7’-位處以連接子與抗體相連；杭州多禧生物科技有限公司將鵝膏毒肽衍生物的5’-、7’-位硝化后引出帶酰胺結(jié)構(gòu)的連接子與抗體偶聯(lián)；韓國Leg℃hem Biosciences公司也研究了從6’-酚羥基和3-δ-位處以連接子與抗體相連的方法。在以上的合成方法中，從6’-酚羥基處接出連接子的方法需要對鵝膏毒肽分子其它位點(diǎn)的羥基進(jìn)行多步保護(hù)和脫保護(hù)，合成路線繁雜，苯環(huán)上5’-、7’-位的取代反應(yīng)定位不確定易導(dǎo)致產(chǎn)品分離有一定難度，收率較低。

發(fā)明內(nèi)容

基于以上現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的目的在于提供一種雙環(huán)八肽類鵝膏毒肽衍生物和生物大分子的偶合物，它們在血液循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)穩(wěn)定，被目標(biāo)細(xì)胞內(nèi)吞后被剪切，釋放出作為RNA聚合酶抑制劑的鵝膏毒肽衍生物，并通過對真核生物mRNA合成的專一抑制產(chǎn)生對細(xì)胞的強(qiáng)烈毒性。

為了實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：結(jié)構(gòu)式(I)的毒素偶聯(lián)物或其藥學(xué)上可接受的鹽：

其中：

n＝0，1或2，

R¹為-H或-OH，

R²為-H或-OH，

R³為-H或-OH或C_1-6烷基，

R⁴為-NH₂或-OH，

R⁵為-L-A，

A為與靶點(diǎn)結(jié)合的生物大分子部分，

L為連接鵝膏毒肽衍生物和生物大分子的任意化學(xué)結(jié)構(gòu)。

作為優(yōu)選，所述L的化學(xué)結(jié)構(gòu)中，包含可裂解型或不可裂解型的結(jié)構(gòu)。

作為優(yōu)選，所述A包括抗體或其抗原結(jié)合片段、抗原結(jié)合多肽。

作為優(yōu)選，所述L與靶結(jié)合生物分子A偶聯(lián)處包含以下結(jié)構(gòu)：