[發明專利]靶向前列腺癌的重組溶瘤腺病毒及其構建方法和應用有效
| 申請號： | 201811045396.6 | 申請日： | 2018-09-07 |
| 公開（公告）號： | CN110885798B | 公開（公告）日： | 2023-10-03 |
| 發明（設計）人： | 方先龍;李潤生;章康健;顧錦法;劉新垣 | 申請（專利權）人： | 上海元宋生物技術有限公司 |
| 主分類號： | C12N7/01 | 分類號： | C12N7/01;A61K35/761;A61P35/00;A61K31/337 |
| 代理公司： | 上海華工專利事務所(普通合伙) 31104 | 代理人： | 繆利明;趙孟琴 |
| 地址： | 201415 上海市奉賢區滬*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 靶向 前列腺癌 重組 溶瘤腺 病毒 及其 構建 方法 應用 | ||
1.一種靶向前列腺癌的重組溶瘤腺病毒OncoAd-DD3-E1A-△E1B-mK5，其特征在于，所述重組溶瘤腺病毒OncoAd-DD3-E1A-△E1B-mK5由DD3啟動子驅動腺病毒E1A基因，腺病毒基因組敲除了E1B基因區域，同時，插入外源基因mk5。
2.一種靶向前列腺癌的重組溶瘤腺病毒OncoAd-DD3-E1A-△E1B-mK5，其特征在于，所述重組溶瘤腺病毒OncoAd-DD3-E1A-△E1B-mK5與多西他賽具有協同增效抗癌作用。
3.一種如權利要求2所述的重組溶瘤腺病毒OncoAd-DD3-E1A-△E1B-mK5的構建方法，其特征在于，包括以下步驟：
步驟一、穿梭質粒Pshuttle-mK5-DD3-E1A-△E1B的構建
利用PCR的方法，將載體Pshuttle-DD3-E1A-△E1B與mK5基因連接到一起，構建穿梭質粒Pshuttle-mK5-DD3-E1A-△E1B；
步驟二、利用PmeI酶切穿梭質粒，然后轉化到含有pAdEasy-1質粒的BJ5183感受態細胞中，使二者發生同源重組，以卡那霉素篩選鑒定以獲得pAdEasy-mK5-DD3-E1A-△E1B；
步驟三、利用PacI酶切質粒pAdEasy-mK5-DD3-E1A-△E1B，用Effectene轉染試劑將酶切后獲得片段轉染入人胚胎腎細胞HEK-293中產生重組溶瘤腺病毒OAd.mK5。
4.一種如權利要求1所述的重組溶瘤腺病毒OncoAd-DD3-E1A-△E1B-mK5在制備治療前列腺癌藥物中的應用。
5.一種如權利要求1所述的重組溶瘤腺病毒OncoAd-DD3-E1A-△E1B-mK5在制備協同增效治療前列腺癌的藥物中的應用。
6.一種治療前列腺癌的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物包括權利要求1所述的重組溶瘤腺病毒OncoAd-DD3-E1A-△E1B-mK5。
7.一種具有協同增效的治療前列腺癌的藥物組合物，其特征在于，所述藥物組合物包括權利要求1所述的重組溶瘤腺病毒OncoAd-DD3-E1A-△E1B-mK5和多西他賽。
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