[發明專利]一種基于sRNA介導的枯草芽孢桿菌轉錄后調控系統有效
| 申請號： | 201811044297.6 | 申請日： | 2018-09-07 |
| 公開（公告）號： | CN109097386B | 公開（公告）日： | 2021-07-27 |
| 發明（設計）人： | 康振;陳堅;堵國成;韋朝寶;金學榮 | 申請（專利權）人： | 江南大學 |
| 主分類號： | C12N15/75 | 分類號： | C12N15/75;C12N1/21;C12R1/125 |
| 代理公司： | 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211 | 代理人： | 張勇 |
| 地址： | 214000 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 基于 srna 枯草 芽孢 桿菌 轉錄 調控 系統 | ||
【權利要求書】：
1.一種基于sRNA介導的枯草芽孢桿菌中的基因轉錄后調控的方法，其特征在于，包括以下步驟：先將枯草芽孢桿菌基因組上內源性毒素-抗毒素系統bsrE-sr5的基因序列從基因組敲除，再(1)在枯草芽孢桿菌基因組上將毒素基因opr5整合至目標基因的終止密碼子TAA之后，或(2)將由組成型啟動子調控的毒素基因opr5連接至目標基因終止密碼子TAA之后以構建表達框，將表達框整合到枯草芽孢桿菌基因組上；然后，將由木糖誘導型啟動子調節的抗毒素基因sr5的表達框組裝在內源表達載體pSTOP1622中，將內源表達載體pSTOP1622轉入枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis 168中，通過木糖誘導控制抗毒素基因sr5的表達，達到對目標基因進行精確的動態調控的目的；所述毒素基因opr5的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；抗毒素基因sr5的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述對目的基因的動態調控為調控蛋白的表達。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述目的基因包括透明質酸、軟骨素、肝素的合成代謝途徑的基因。
3.應用權利要求1或2所述方法構建得到的基因工程菌。
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