[發(fā)明專利]一種金線蓮組織培養(yǎng)快速繁殖的方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201811043235.3 | 申請日: | 2018-09-07 |
| 公開(公告)號: | CN109042328A | 公開(公告)日: | 2018-12-21 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 王潔華;毛虹禹;宋秋芳 | 申請(專利權(quán))人: | 天津大學(xué) |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 天津一同創(chuàng)新知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 12231 | 代理人: | 陸藝 |
| 地址: | 300072*** | 國省代碼: | 天津;12 |
| 權(quán)利要求書: | 查看更多 | 說明書: | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 金線蓮 接種 無菌水沖洗 快速繁殖 組織培養(yǎng) 成苗 浸泡 取出 乙醇水溶液浸泡 氯化汞水溶液 組織培養(yǎng)過程 可濕性粉劑 生根培養(yǎng)基 誘導(dǎo)培養(yǎng)基 增殖培養(yǎng)基 繁殖周期 恒溫?fù)u床 培養(yǎng)周期 水稀釋液 多菌靈 零污染 生根率 小植株 誘導(dǎo)率 單株 莖段 水中 無菌 小苗 搖動 組培 沖洗 葉子 誘導(dǎo) 新鮮 | ||
1.一種金線蓮組織培養(yǎng)快速繁殖的方法,其特征在于:包括以下步驟:
(1)將新鮮金線蓮去葉的莖浸泡在多菌靈50%可濕性粉劑的1200~1500質(zhì)量倍水稀釋液中6~8小時,取出,用自來水沖洗干凈;置于超凈工作臺,切莖段,用體積濃度75%的乙醇水溶液浸泡消毒30~40s,取出,無菌水沖洗,再置于質(zhì)量濃度0.1%的氯化汞水溶液中浸泡10~12min,取出,置于無菌水中,并放到恒溫?fù)u床內(nèi),恒溫?fù)u床的轉(zhuǎn)速為80~100rpm,溫度為24~26℃,搖動10-20min,再用無菌水沖洗4-6次;
(2)將步驟(1)獲得的外植體接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基,在24~26℃,光照強(qiáng)度500-1000lux,光照時間10h/d,培養(yǎng),誘導(dǎo)出小苗;
(3)將步驟(2)獲得的小苗接種到增殖培養(yǎng)基,在24~26℃,光照強(qiáng)度500-1000lux,光照時間12h/d,培養(yǎng),得到長出2-3片葉子的金線蓮小植株;
(4)將步驟(3)獲得的小植株切分成單株,接種到生根培養(yǎng)基,在24~26℃,光照強(qiáng)度1000-2000lux,光照時間12h/d,培養(yǎng),得到健壯成苗。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為:在MS培養(yǎng)基中加入萘乙酸,使終濃度為0.5mg/L,加入6-芐氨基腺嘌呤,使終濃度為3mg/L,加入蔗糖,使終濃度為30g/L,加入瓊脂,使終濃度為6g/L,pH=5.8。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述增殖培養(yǎng)基的配方為:在MS培養(yǎng)基中加入萘乙酸,使終濃度為0.5mg/L,加入6-芐氨基腺嘌呤,使終濃度為3mg/L,加入激動素,使終濃度為1mg/L,加入蔗糖,使終濃度為30g/L,加入瓊脂,使終濃度為6g/L,pH=5.8。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于所述生根培養(yǎng)基的配方為:在1/2MS培養(yǎng)基中加入萘乙酸,使終濃度為1mg/L,加入吲哚丁酸,使終濃度為1mg/L,加入蔗糖,使終濃度為30g/L,加入瓊脂,使終濃度為4g/L,加入活性炭,使終濃度為5g/L,加入香蕉,使終濃度為50g/L,pH=5.8。
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