[發(fā)明專利]一種提高單核細(xì)胞向多潛能細(xì)胞轉(zhuǎn)化的無(wú)血清培養(yǎng)基

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811040112.4
• 申請(qǐng)日: 2018-08-30
• 公開（公告）號(hào): CN109112099A
• 公開（公告）日: 2019-01-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馬亞?wèn)|;黃宗堂;曹娜
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 豐澤康生物醫(yī)藥（深圳）有限公司
• 主分類號(hào): C12N5/074
• 分類號(hào): C12N5/074
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明涉及細(xì)胞的誘導(dǎo)分化技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種提高單核細(xì)胞向多潛能細(xì)胞轉(zhuǎn)化的無(wú)血清培養(yǎng)基，包括以下物質(zhì)：無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)物、氨基酸、氨基酸鹽、植物凝集素、胰島素、碳源、細(xì)胞生長(zhǎng)因子、維生素及抗氧化劑、蛋白質(zhì)、微量元素和pH值的指示劑。本發(fā)明提供的一種提高單核細(xì)胞向多潛能細(xì)胞轉(zhuǎn)化的無(wú)血清培養(yǎng)基，在多種皮生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)下，提高單核細(xì)胞轉(zhuǎn)化比如血管內(nèi)皮細(xì)胞等多潛能細(xì)胞，為臨床上更合理的將單核細(xì)胞用于治療提供了實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和理論依據(jù)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及細(xì)胞的誘導(dǎo)分化技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種提高單核細(xì)胞向多潛能細(xì)胞轉(zhuǎn)化的無(wú)血清培養(yǎng)基。

背景技術(shù)

傳統(tǒng)的觀點(diǎn)認(rèn)為，單核細(xì)胞僅是吞噬細(xì)胞的前體細(xì)胞，在體內(nèi)不同環(huán)境下能分化為巨噬細(xì)胞、樹突狀細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞。但近幾年的研究發(fā)現(xiàn)，單核細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)具有多向性的分化潛能。比如現(xiàn)在研究較多的有單核細(xì)胞向淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化潛能的，在生長(zhǎng)因子在內(nèi)的多種因子誘導(dǎo)下，單核細(xì)胞能夠轉(zhuǎn)化成血管內(nèi)皮細(xì)胞，比如采用Ficoll密度梯度離心法分離成人新鮮外周血單核細(xì)胞，用細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)，然后分別用纖維連接蛋白、腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)24h。但是目前的單核細(xì)胞向多潛能細(xì)胞轉(zhuǎn)化率較低。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種提高單核細(xì)胞向多潛能細(xì)胞轉(zhuǎn)化的無(wú)血清培養(yǎng)基，通過(guò)該培養(yǎng)基，將提高單核細(xì)胞誘導(dǎo)分化為成熟多潛能細(xì)胞。

本發(fā)明的目的可以通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)：

一種提高單核細(xì)胞向多潛能細(xì)胞轉(zhuǎn)化的無(wú)血清培養(yǎng)基，包括以下物質(zhì)：無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)物、氨基酸、氨基酸鹽、植物凝集素、胰島素、碳源、細(xì)胞生長(zhǎng)因子、維生素及抗氧化劑、蛋白質(zhì)、微量元素和pH值的指示劑。

其中，所述的無(wú)機(jī)鹽包括的各物質(zhì)的濃度為，2000-3000mg/L的CaCl₂，3000-4000mg/L的MgSO₄，500-800mg/L的KCl，150-200mg/L的NaHCO₃，1500-2000mg/L的NaCl，500-800mg/L的MgCl₂，400-600mg/L的NaH₂PO₄，0.01-0.03mg/L的CoCl₂-6H₂O，0.01-0.02mg/L的MnCl₂-4H₂O，0.02-0.20mg/L的ZnCl₂。

所述的有機(jī)物包括的各物質(zhì)的濃度為，50-90mg/L的4-丁二胺二鹽酸鹽、200-400mg/L的鹽酸吡哆醛、4000-6000mg/L的丙酮酸鈉。

所述的氨基酸包括的各物質(zhì)的濃度為，氨基酸包括的各物質(zhì)的濃度為，100-300mg/L的L-絲氨酸，100-150mg/L的甘氨酸，100-150mg/L的L-色氨酸，160-260mg/L的胱氨酸，180-220mg/L的L-羥脯氨酸，200-300mg/L的L-谷氨酸，200-600mg/L的L-蘇氨酸，300-400mg/L的L-酪氨酸，300-500mg/L的L-天門冬氨酸，300-500mg/L的L-異亮氨酸，300-600mg/L的L-蛋氨酸，400-600mg/L的L-丙氨酸，400-700mg/L的組氨酸，450-600mg/L的L-谷氨酰胺，700-1000mg/L的L-亮氨酸，900-1200mg/L的L-脯氨酸，1000-1500mg/L的纈氨酸，1200-1800mg/L的賴氨酸，1200-1800mg/L的精氨酸，1800-3200mg/L的L-天門冬酰胺，2500-3000mg/L的L-苯丙氨酸。

所述的氨基酸鹽包括的各物質(zhì)的濃度為，300-400mg/L的L-賴氨酸鹽酸鹽、300-500mg/L的L-胱氨酸鹽酸鹽、300-500mg/L的L-半胱氨酸鹽酸鹽、700-900mg/L的L-精氨酸鹽酸鹽、700-1000mg/L的L-酪氨酸鹽酸鹽，1000-1500mg/L的L-組氨酸鹽酸鹽。