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[發明專利]一種提高單核細胞向多潛能細胞轉化的無血清培養基在審

專利信息
申請號: 201811040112.4 申請日: 2018-08-30
公開(公告)號: CN109112099A 公開(公告)日: 2019-01-01
發明(設計)人: 馬亞東;黃宗堂;曹娜 申請(專利權)人: 豐澤康生物醫藥(深圳)有限公司
主分類號: C12N5/074 分類號: C12N5/074
代理公司: 暫無信息 代理人: 暫無信息
地址: 518001 廣東省深圳市羅湖區東*** 國省代碼: 廣東;44
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摘要:
搜索關鍵詞: 單核細胞 多潛能細胞 無血清培養基 轉化 細胞生長因子 血管內皮細胞 無機鹽 皮生長因子 無血清培養 氨基酸鹽 抗氧化劑 實驗數據 誘導分化 微量元素 凝集素 胰島素 有機物 指示劑 氨基酸 維生素 蛋白質 誘導 細胞 治療
【權利要求書】:

1.一種提高單核細胞向多潛能細胞轉化的無血清培養基,其特征在于,包括以下物質:無機鹽、有機物、氨基酸、氨基酸鹽、植物凝集素、胰島素、碳源、細胞生長因子、維生素及抗氧化劑、蛋白質、微量元素和pH值的指示劑。

2.根據權利要求1所述的一種提高單核細胞向多潛能細胞轉化的無血清培養基,其特征在于,所述的無機鹽包括的各物質的濃度為,2000-3000mg/L的CaCl2,3000-4000mg/L的MgSO4,500-800mg/L的KCl,150-200mg/L的NaHCO3,1500-2000mg/L的NaCl,500-800mg/L的MgCl2,400-600mg/L的NaH2PO4,0.01-0.03mg/L的CoCl2-6H2O,0.01-0.02mg/L的MnCl2-4H2O,0.02-0.20mg/L的ZnCl2

3.根據權利要求1所述的一種提高單核細胞向多潛能細胞轉化的無血清培養基,其特征在于,所述的有機物包括的各物質的濃度為,50-90mg/L的4-丁二胺二鹽酸鹽、200-400mg/L的鹽酸吡哆醛、4000-6000mg/L的丙酮酸鈉。

4.根據權利要求1所述的一種提高單核細胞向多潛能細胞轉化的無血清培養基,其特征在于,所述的氨基酸包括的各物質的濃度為,氨基酸包括的各物質的濃度為,100-300mg/L的L-絲氨酸,100-150mg/L的甘氨酸,100-150mg/L的L-色氨酸,160-260mg/L的胱氨酸,180-220mg/L的L-羥脯氨酸,200-300mg/L的L-谷氨酸,200-600mg/L的L-蘇氨酸,300-400mg/L的L-酪氨酸,300-500mg/L的L-天門冬氨酸,300-500mg/L的L-異亮氨酸,300-600mg/L的L-蛋氨酸,400-600mg/L的L-丙氨酸,400-700mg/L的組氨酸,450-600mg/L的L-谷氨酰胺,700-1000mg/L的L-亮氨酸,900-1200mg/L的L-脯氨酸,1000-1500mg/L的纈氨酸,1200-1800mg/L的賴氨酸,1200-1800mg/L的精氨酸,1800-3200mg/L的L-天門冬酰胺,2500-3000mg/L的L-苯丙氨酸;

所述的氨基酸鹽包括的各物質的濃度為,300-400mg/L的L-賴氨酸鹽酸鹽、300-500mg/L的L-胱氨酸鹽酸鹽、300-500mg/L的L-半胱氨酸鹽酸鹽、700-900mg/L的L-精氨酸鹽酸鹽、700-1000mg/L的L-酪氨酸鹽酸鹽,1000-1500mg/L的L-組氨酸鹽酸鹽。

5.根據權利要求1所述的一種提高單核細胞向多潛能細胞轉化的無血清培養基,其特征在于,植物凝集素的濃度為10-20mg/L,植物凝集素由以下方法制備所得,在45-50℃溫度下,將豆類的種子粉碎到100目過篩,粉碎后的粉末加入浸泡液中,浸泡液為質量濃度1%的氯化鈉水溶液,或pH=6.5-7.2的磷酸緩沖鹽溶液,料水比例為1∶5;浸泡過程中還施加超聲波進行輔助提取,聲強為20-40W/cm2;或者施加微波進行輔助提取,微波強度為10-20W/L;攪拌浸泡100-180分鐘,過濾去除豆皮、豆渣,濾液離心分離得上清液,上清液濃縮得到濃縮液,濃縮液分離、純化得到植物凝集素。

6.根據權利要求1所述的一種提高單核細胞向多潛能細胞轉化的無血清培養基,其特征在于,所述的胰島素為重組人胰島素,濃度為2-50μg/mL。

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