[發(fā)明專利]一種檢測多環(huán)芳烴的類酶聯(lián)免疫試劑盒及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811038023.6
• 申請日: 2018-09-06
• 公開（公告）號: CN109212187B
• 公開（公告）日: 2022-01-11
• 發(fā)明（設計）人: 趙曉祥;張璐璐;程晨;亢昕;張紫琴;馮璐
• 申請（專利權(quán)）人: 東華大學
• 主分類號: G01N33/535
• 分類號: G01N33/535;G01N33/58;G01N30/74;G01N30/02
• 代理公司: 上海泰能知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙) 31233
• 代理人: 黃志達

1.一種檢測多環(huán)芳烴的類酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于，包括一抗芳烴受體AhR、酶標二抗、多環(huán)芳烴PAHs標準品溶液、洗滌液、封閉液、顯色液、終止液；其中所述酶標二抗為蒽。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述試劑盒，其特征在于，所述芳烴受體AhR為：取喂養(yǎng)于含多環(huán)芳烴PAHs水中的鯉魚的肝臟，清洗后吸干水分，然后加入HEDG緩沖液勻漿，離心取上清，純化，得到芳烴受體AhR。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述試劑盒，其特征在于，所述純化為采用離子交換層析法進行純化。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述試劑盒，其特征在于，所述洗滌液為PBS-T；封閉液為質(zhì)量體積百分比1%明膠，終止液為2 M 硫酸溶液。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述試劑盒，其特征在于，所述顯色液為底物溶液A和底物溶液B；其中底物溶液A為3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺TMB底物溶液，底物溶液B為雙氧水。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述試劑盒，其特征在于，所述多環(huán)芳烴PAHs標準品溶液的濃度分別為：1 ng/ml、5 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/mL。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括酶標板。

8.一種樣品中多環(huán)芳烴的類酶聯(lián)免疫檢測方法，包括：

采用權(quán)利要求1所述試劑盒，將芳烴受體AhR吸附在固體載體上，然后加入待測PAHs樣品、酶標二抗，酶標二抗和待測PAHs與芳烴受體AhR進行競爭反應，反應后用顯色液顯色，終止液終止反應，采用酶標儀測定OD值，通過標準曲線，確定待測PAHs濃度。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述檢測方法，其特征在于，所述酶標儀于450 nm處測定OD值。