[發明專利]一種富硒靈芝菌絲粉的制備方法

有效

• 申請號: 201811036257.7
• 申請日: 2018-09-06
• 公開（公告）號: CN109234171B
• 公開（公告）日: 2021-08-20
• 發明（設計）人: 劉玉環;劉童瑩;王允圃;巫小丹;彭紅;鄭洪立;向書玉;艾力;曹雷鵬;張錦勝
• 申請（專利權）人: 南昌大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 南昌新天下專利商標代理有限公司 36115
• 代理人: 施秀瑾

1.一種富硒靈芝菌絲粉的制備方法，其特征是包括以下步驟：

步驟1、靈芝母種制備：

從中國工業微生物菌種保藏管理中心購買靈芝菌株，以PDA培養基進行活化；使用活化用PDA培養基配方如下：去皮馬鈴薯200g煮汁，V_B10.01g/l、MgSO₄0.2g、KH₂PO₄1.0g、水1000ml，高壓蒸汽滅菌，pH自然；葡萄糖20g、瓊脂18g、水1000ml， pH自然；在30℃，遮光培養；

從活化好的優勢菌落的邊沿挖取菌絲，接種到馴化培養基中；使用馴化用斜面培養基斜面培養基：富硒高粱種子粉、富硒螺旋藻粉各10g、V_B10.01g、MgSO₄0.2g、KH₂PO₄1.0g、葡萄糖5g、瓊脂18g、水1000ml，高壓蒸汽滅菌，pH自然；在28℃，遮光培養；

從馴化培養基中挑選長勢旺盛的菌絲體接種到母種培養斜面上，在18~30℃下，遮光培養到菌絲鋪滿3/4斜面，放入4℃冷藏柜，避光保存備用；母種斜面培養基：富硒高粱種子粉、富硒螺旋藻粉各15g、V_B10.01g、MgSO₄0.2g、KH₂PO₄1.0g、瓊脂18g、水1000ml，高壓蒸汽滅菌，pH自然；

步驟2、靈芝液態發酵菌種制備：

在2000ml大錐形瓶中裝如1200ml液體培養基，接種3個母管馴化好的靈芝母種，搖床上以最小的搖動頻率，在28~30℃下，遮光培養，直到形成密集的菌絲球即可用于固態發酵的接種劑；液體培養基配方：富硒高粱種子粉、富硒螺旋藻粉各15g、V_B10.01g、MgSO₄0.2g、KH₂PO₄1.0g、葡萄糖5g、瓊脂18g、水1000ml，高壓蒸汽滅菌，調節pH6.0；

步驟3、靈芝固體發酵培養基制備：

靈芝固體發酵培養基配方：富硒高粱種子粉65~75份、富硒螺旋藻粉25~35份，水35~45份，充分混合均勻裝入底部鋪墊3層無菌紗布的不銹鋼蒸籠中，厚度4cm，攤平覆蓋3層無菌紗布，100℃蒸汽蒸煮30min，冷卻，搬入無菌培養室；

步驟4、靈芝培養與菌絲溶解：

在無菌培養室中，嚴格按照無菌接種要求，掀開表層覆蓋紗布、向滅菌后的固體發酵培養基中接種液態發酵菌種，接種量為固體培養基重量的15%~20%；重新覆蓋紗布；在28~30℃下，遮光培養到菌絲全面覆蓋培養基，整個過程持續3~5天；

將發酵充分的靈芝培養料裝入滅菌好的陶瓷大罐中，保鮮膜封口，移入無菌加工車間智能培養箱中，把溫度升高到45℃，保溫4~6小時，酶解充分后，立即轉入熱風干燥箱中80℃下鼓風干燥到含水率低于12%；

步驟5、富硒靈芝粉制備：

將步驟4制備的靈芝干發酵料以錘片式粉碎機過80~120目網；再以超微粉碎機粉碎過250~300目篩網，得到有機硒含量300~500mg/kg的超微化富硒靈芝粉，以100ml塑料瓶或棕色玻璃瓶灌裝密封；產品可以用于食品有機硒的安全添加。