[發明專利]一種刺參腸分離蛋白的提取方法

在審

• 申請號: 201811034370.1
• 申請日: 2018-09-06
• 公開（公告）號: CN109007233A
• 公開（公告）日: 2018-12-18
• 發明（設計）人: 吳海濤;郭曉坤;杜椅楠;韓佳潤;韓宜潼;肖琳
• 申請（專利權）人: 大連工業大學
• 主分類號: A23J1/04
• 分類號: A23J1/04
• 代理公司: 大連格智知識產權代理有限公司 21238
• 代理人: 劉琦

本發明公開了一種刺參腸分離蛋白的提取方法，包括步驟：刺參腸勻漿、制備刺參腸脫脂粉、堿溶、酸沉、透析及干燥。本發明以刺參加工過程中的下腳料——刺參腸為原料，進行蛋白質的回收利用，為刺參腸的開發提供了一種重要途徑，即減少了資源浪費，又提高了經濟效益；與其它的蛋白質分離提取方法相比，本發明提取過程簡單，易于操作，實驗室條件利于控制，經濟適用價值強，適用于大規模的工業化生產；制備的分離蛋白其溶解性高，持水，持油性、乳化性較脫脂粉有明顯的改善，且分離蛋白的持油性、乳化性顯著優于大豆分離蛋白。

技術領域

本發明屬于食品加工技術領域，涉及一種分離蛋白的提取方法，更具體的說，是涉及一種刺參腸分離蛋白的提取方法。

背景技術

海參是一種重要的水產品，富含多種活性成分，營養價值高，被視為佐膳佳品和理想滋補品。近些年，隨著需求量的不斷增加，我國海參養殖和加工產業迅速發展，2015年全國海參海水養殖產量超過20萬噸，但海參加工過程中的下腳料——海參腸則很少得到利用。在海參生產中，海參腸一般作為廢棄物被遺棄，這不僅造成了資源浪費還帶來了環境污染。海參腸中蛋白含量豐富，如果能對其中的蛋白質進行回收和利用，將會帶來顯著的經濟效益和社會效益。

目前關于海參腸的研究主要集中在一些內源酶方面，例如從刺參腸中分離純化出了β-1,3-葡聚糖酶、組織蛋白酶B、乙酰膽堿酯酶和堿性磷酸酶等。而對海參腸分離蛋白的提取和分離的研究尚未見報道。

發明內容

刺參腸富含蛋白質，是優質多肽的來源，但刺參腸中蛋白質的分離和制備方法尚未見報道。為解決刺參腸中蛋白質的回收問題，本發明提供了一種刺參腸分離蛋白的制備方法，本發明所述方法具有操作簡單、生產成本低的特點。

一種刺參腸分離蛋白的提取方法，包括如下步驟：

S1、刺參腸勻漿：將刺參腸去泥沙，洗凈，制備刺參腸勻漿液；

優選方式下，步驟S1所述制備刺參腸勻漿液的參數為：2000～3000rpm條件下勻漿3～5min。

S2、制備刺參腸脫脂粉：向步驟S1所述刺參腸勻漿液中加入正己烷/無水乙醇混合溶液，經過脫脂，抽濾、室溫風干、粉碎、過100目篩后得刺參腸脫脂粉；

優選方式下，步驟S2所述脫脂具體為：向步驟S1所述刺參腸勻漿液中加入正己烷/無水乙醇混合溶液，在600～800rpm、4℃條件下攪拌5～7h進行脫脂，所述脫脂過程重復1～3次；所述正己烷/無水乙醇混合溶液中正己烷和無水乙醇的體積比為2～3:1；正己烷/無水乙醇混合溶液和刺參腸勻漿液的體積比為9～11:1。

S3、堿溶：將步驟S2所得刺參腸脫脂粉加入去離子水混勻，調至堿性pH值，攪拌，離心收集上清，得刺參腸分離蛋白提取液；

優選方式下，步驟S3所述堿溶具體為：將步驟S2所得刺參腸脫脂粉按料液比(w/v)1:10～35加入去離子水，混勻，用1mol/L NaOH調至pH8.0～11.5，4～60℃、300～500rpm條件下攪拌2～3h，3000～5000r/min離心20～30min，收集上清液，即刺參腸分離蛋白提取液。

S4、酸沉：將步驟S3所得刺參腸分離蛋白提取液，調至酸性pH值，靜置，離心，收集沉淀；

優選方式下，步驟S4所述酸沉具體為：用1mol/L HCl將步驟S3所得刺參腸分離蛋白提取液調至pH2～4.6，靜置1～5h，8000～12000r/min離心10～30min，收集沉淀。

S5、透析：將步驟S4所得沉淀溶于去離子水中，使用磷酸鹽緩沖液進行透析除鹽；