[發(fā)明專利]一種從甜菊葉中分離甜菊糖苷并聯(lián)產(chǎn)綠原酸的工藝

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201811033480.6
• 申請(qǐng)日: 2018-09-05
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108864223A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-11-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周建海;余祖兵;冒小云;石磊;陳輝
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 安徽龍津生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C07H15/256
• 分類號(hào): C07H15/256;C07H1/08;C07C69/732;C07C67/56;C07C67/48
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1.一種從甜菊葉中分離甜菊糖苷并聯(lián)產(chǎn)綠原酸的工藝，其特征在于，包括以下步驟：

1)提取：將甜菊葉用粉碎機(jī)粉碎，過(guò)10目篩，得甜菊葉粗粉A；取重量份為1份的甜菊葉粗粉A，采用5-10份50-80℃的水?dāng)嚢杼崛∪危喜⑷翁崛∫海^(guò)300目布袋過(guò)濾器，得澄清的提取濾液B；

2)一次吸附分離：將提取濾液B上大孔吸附樹(shù)脂，吸附飽和后，停止上料，用水洗吸附飽和的大孔吸附樹(shù)脂，并將水清洗液與經(jīng)過(guò)吸附處理的提取濾液B混合，得吸附剩液C；將水洗后的大孔吸附樹(shù)脂，用50-85％乙醇解吸，收集得第一次解吸液D。

3)結(jié)晶、分離：將第一次解吸液D減壓濃縮至甜菊葉粗粉A重量份的2-3倍，加入95％乙醇結(jié)晶5-12小時(shí)；將結(jié)晶料用離心機(jī)離心，95％乙醇淋洗，得甜菊糖苷粗品E；

4)脫色、純化：將甜菊糖苷粗品E用95％乙醇溶解，溶解液經(jīng)過(guò)中性氧化鋁過(guò)濾，再用95％乙醇淋洗，得脫色純化液；將脫色純化液加入層析硅膠，攪拌后濃縮至干，加入到空白硅膠上，用乙酸乙酯：異丙醇梯度洗脫，并用HPLC跟蹤分析，收集得甜菊糖苷料液F；

5)重結(jié)晶、分離：將甜菊糖苷料液F濃縮至高濃度，加入80％-90％乙醇，重結(jié)晶24-48小時(shí)；將結(jié)晶好的物料用離心機(jī)離心，得甜菊糖苷濕品G；

6)干燥、制粉：將甜菊糖苷濕品H加水溶解，經(jīng)噴霧干燥制得甜菊糖苷干品；將甜菊糖苷干品粉碎，經(jīng)80目篩分，得甜菊糖苷成品H；

7)二次吸附分離：將2)所得的吸附剩液C，加入酸性緩沖溶液，調(diào)節(jié)pH到3-4，倒入洗凈的大孔吸附樹(shù)脂中，吸附飽和后，停止上料，先用水洗大孔吸附樹(shù)脂，再用60-80％乙醇解吸，收集得第二次解吸液I。

8)噴霧干燥：將第二次解吸液I濃縮，回收乙醇后，得到濃縮液，噴霧干燥后，得粉末狀的綠原酸副產(chǎn)品J。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從甜菊葉中分離甜菊糖苷并聯(lián)產(chǎn)綠原酸的工藝，其特征在于，所述步驟1)-步驟8)中使用過(guò)后的乙醇，水，乙酸乙酯及異丙醇均經(jīng)過(guò)旋蒸裝置回收處理。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從甜菊葉中分離甜菊糖苷并聯(lián)產(chǎn)綠原酸的工藝，其特征在于，所述步驟6)和步驟8)中的噴霧干燥的溫度不超過(guò)80℃。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從甜菊葉中分離甜菊糖苷并聯(lián)產(chǎn)綠原酸的工藝，其特征在于，所述步驟2)和步驟7)中的大孔吸附樹(shù)脂的型號(hào)具體為AB-8，X-5，NK-2，NKA-2，NK-9，D3520，D101及WLD中的任一種。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從甜菊葉中分離甜菊糖苷并聯(lián)產(chǎn)綠原酸的工藝，其特征在于，所述步驟4)中，中性氧化鋁的用量為甜菊葉粗粉A重量份的1/5-1/2，所述硅膠的總用量占甜菊葉粗粉A重量份的60％-120％。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從甜菊葉中分離甜菊糖苷并聯(lián)產(chǎn)綠原酸的工藝，其特征在于，所述步驟7)中，緩沖溶液具體為磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖體系，其pH范圍控制為2.5-3.5。