[發明專利]一種川貝母內生真菌介導納米銀的生物合成方法及應用

在審

• 申請號: 201811027521.0
• 申請日: 2018-09-04
• 公開（公告）號: CN109097405A
• 公開（公告）日: 2018-12-28
• 發明（設計）人: 吳衛;鄧克莉;蘇天驕;陳銀銀;侯凱;張慧慧;石憲
• 申請（專利權）人: 四川農業大學
• 主分類號: C12P3/00
• 分類號: C12P3/00;C12Q1/6895;C12Q1/04;C12R1/645
• 代理公司: 成都環泰知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 51242
• 代理人: 趙紅欣;李斌

本發明屬于生物合成技術領域，公開了一種川貝母內生真菌介導納米銀的生物合成方法及應用，利用川貝母內生真菌浸泡液與硝酸銀溶液反應，對分離得到的15株川貝母內生真菌進行初篩后，利用川貝母內生真菌CBY4和CBY13通過生物合成法制備納米銀4?AgNPs和13?AgNPs；生物合成過程中，合成條件為：pH3?11，硝酸銀溶液濃度為2mmol/L，2000Lux光照強，50℃。本發明首次發現川貝母中分離的內生真菌CBY4和CBY13具有合成納米銀的能力，優化得到了一個比較適合其納米銀合成的反應條件，同時發現合成的納米銀具有一定的抑菌和抗腫瘤活性。

技術領域

本發明屬于生物合成技術領域，尤其涉及一種川貝母內生真菌介導納米銀的生物合成方法及應用。

背景技術

目前，業內常用的現有技術是這樣的：

1、內生真菌的分析現狀

內生真菌是一類生活于健康植物的組織細胞間或細胞內，且不會造成明顯疾病癥狀的真菌。自1898 年vogl等科學家成功地從黑麥草的種子中分離出第一株內生真菌，120年來，關于內生真菌的分析從未間 斷過，目前內生真菌的分析已經覆蓋了整個植物界，不管是常見的低等植物如苔蘚、地衣等，還是經濟價 值高的高等植物如人參、鐵皮石斛等。尤其是在1993年，美國蒙大拿州立大學Strobel博士等首次從短 葉紅豆杉的韌皮部中分離得到1株能合成新型抗癌物質紫杉醇的內生真菌安德氏紫杉霉Taxomyces andreanae，這項分析結果直接而有力地證明植物內生真菌能夠合成與宿主植物相同或相似活性成分。此 后植物內生真菌的分離純化、菌種鑒定、活性檢測逐漸成為分析熱點。

1.1內生真菌的多樣性

內生真菌廣泛存在于整個植物界中，是一個龐大而特殊的真菌類群，相較于其他真菌類群，內生真菌 的分析尚處于起步階段，學界對內生真菌的種類和數量還知之甚少。最初Hawksworth在估算自然界中真 菌存在的數量時，并沒有將內生真菌計算在內。

學者從現已分析過的植物體內都能分離到數量不等的內生真菌，表明內生真菌是普遍存在于植物體內 的，數量從十幾種到近百種，還從未出現過沒有分離得到內生真菌的現象。田小曼等從菊科植物青蒿的根、 莖、葉三個不同部位中,成功地分離出12株內生真菌。伍等從兩個產區的玄參中成功分離得到58株內生 真菌。秦盛等以一種墨西哥仙人掌Opuntiamicrodasys(Lehm.)Pfeiff的肉質莖為材料，從中分離獲得31 株內生真菌。李治瀅等以藥用植物烏頭的側根、莖、葉、花為材料，從這四個不同部位中分離獲得164株 內生真菌^[8]。在對內生真菌與宿主進行專一性分析時發現平均每種宿主至少有4-5種專性內生真菌,如果 按地球目前己探明存在的25萬種植物計算,則整個植物界內生真菌的總數可以超過100萬種。

1.2內生真菌的作用

內生真菌作為一類長期生活在宿主植物體內的真菌類群，在與宿主長期協同進化的過程中形成了特殊 的互惠共生關系。一方面宿主植物可以為內生真菌提供生長所需的營養物質和棲息場所，另一方面內生真 菌也可以合成一些對宿主植物有利的活性成分。因此內生真菌對宿主植物的生長發育和進化演變起到重要 作用。

1.2.1促進宿主植物的生長