[發明專利]CO2休克法誘導產生腫瘤細胞凋亡小體及其抗腫瘤應用在審
| 申請號： | 201811023910.6 | 申請日： | 2018-09-04 |
| 公開（公告）號： | CN109294992A | 公開（公告）日： | 2019-02-01 |
| 發明（設計）人： | 劉安軍;呂淑明 | 申請（專利權）人： | 慶云堂生物科技（北京）有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/09 | 分類號： | C12N5/09;A61K39/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 天津盛理知識產權代理有限公司 12209 | 代理人： | 陳娟 |
| 地址： | 100176 北京市大興區北京經*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 腫瘤細胞凋亡 抗腫瘤 小體 凋亡小體 休克 誘導 抗腫瘤作用 體外指標 腫瘤細胞 放入 應用 體內 檢測 試驗 | ||
【權利要求書】：
1.一種CO2休克法誘導產生腫瘤細胞凋亡小體，其特征在于：所述的凋亡小體是將腫瘤細胞放入不含CO2培養箱中使腫瘤細胞凋亡得到的。
2.根據權利要求1所述的CO2休克法誘導產生腫瘤細胞凋亡小體，其特征在于：制備方法包括如下步驟：
(1)將腫瘤細胞孵育至對數生長期，放入不含CO2的培養箱中以誘導腫瘤細胞凋亡；
(2)細胞凋亡后，收集細胞的培養基上清液，在室溫下離心兩次；
(3)將上清移至無菌注射器中，安裝濾膜過濾裝置，給予輕微壓力，緩慢使上清通過5μm的濾膜；
(4)離心管收集濾液，放入高速離心機中在4℃～6℃下，16000g～18000g離心18min～23min；
(5)將沉灰色淀重新懸浮并用PBS洗滌，且在16000g～18000g下再離心30min～35min，管底沉淀即為純化的腫瘤細胞凋亡小體。
3.根據權利要求2所述的CO2休克法誘導產生腫瘤細胞凋亡小體，其特征在于：通過流式細胞分選術或差速離心技術對所制備的腫瘤細胞凋亡小體進一步純化。
4.一種權利要求1～3任一權利要求所述的CO2休克法誘導產生腫瘤細胞凋亡小體在抗腫瘤藥物中的應用。
5.一種權利要求1～3任一權利要求所述的CO2休克法誘導產生腫瘤細胞凋亡小體在抗腫瘤疫苗中的應用。
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