[發明專利]一種類胡蘿卜素降解酶的制備方法有效
| 申請號： | 201811023609.5 | 申請日： | 2018-09-04 |
| 公開（公告）號： | CN109266624B | 公開（公告）日： | 2021-12-10 |
| 發明（設計）人： | 張惠玲;郝向峰;張金宏;楊麗麗;陸文靜 | 申請（專利權）人： | 百瑞源枸杞股份有限公司 |
| 主分類號： | C12N9/00 | 分類號： | C12N9/00;C12N1/20;C12G3/026;C12R1/01 |
| 代理公司： | 北京瑞盛銘杰知識產權代理事務所(普通合伙) 11617 | 代理人： | 郭曉迪 |
| 地址： | 750200 寧夏回族自治區*** | 國省代碼： | 寧夏;64 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 類胡蘿卜素 降解 制備 方法 | ||
1.一種類胡蘿卜素降解酶的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
①庫特氏桿菌液的制備
②擴大培養
取斜面試管庫特氏桿菌（
③發酵
液體培養基→接種庫特氏桿菌種子液2%→30℃-35℃，pH=3.0-3.5，140r/min發酵8-10h→發酵液；
④類胡蘿卜素降解酶制備
發酵液→4℃，10000 r/min離心100-150min→取上清液→類胡蘿卜素降解酶粗酶液；
所述庫特氏桿菌為（
上述各步驟中液體培養基組成為：硝酸鈉 3g/L、磷酸氫二鉀 1g/L、硫酸鎂 0.5g/L、氯
化鉀 0.5g/L、硫酸鐵 0.01g/L、蔗糖 30g/L、YNB合成培養基6.7g/L、β-胡蘿卜素15g/L；pH= 3.2。
2.根據權利要求1所述類胡蘿卜素降解酶的制備方法，其特征在于，步驟還包括：將粗酶液經冷凍、干燥、濃縮并利用透析法純化。
3.根據權利要求2所述類胡蘿卜素降解酶的制備方法，其特征在于，步驟②擴大培養，各階段的培養時間為11小時；步驟③發酵溫度為33℃，發酵時pH=3.3，發酵時間為9h；步驟④類胡蘿卜素降解酶制備，離心時間為120min。
4.根據權利要求1所述類胡蘿卜素降解酶的制備方法，其特征在于，步驟②擴大培養，各階段的培養時間為10小時；步驟③發酵溫度為30℃-32℃，發酵時pH=3.0-3.2，發酵時間為10h；步驟④類胡蘿卜素降解酶制備，離心時間為100min。
5.根據權利要求2所述類胡蘿卜素降解酶的制備方法，其特征在于，步驟②擴大培養，各階段的培養溫度為36-37℃、培養時間為12小時；步驟③發酵溫度為34℃-35℃，發酵時pH=3.4-3.5，發酵時間為10h；步驟④類胡蘿卜素降解酶制備，離心時間為150min。
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