[發明專利]一種檢測mircoRNA的納米探針的制備方法

有效

• 申請號: 201811016661.8
• 申請日: 2018-09-03
• 公開（公告）號: CN109097441B
• 公開（公告）日: 2021-07-06
• 發明（設計）人: 王懷松;蘇彥龍;王丹丹;陳諾;趙雅萱;郝亞波;魏紀平
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: C12Q1/6806
• 分類號: C12Q1/6806
• 代理公司: 北京卓特專利代理事務所(普通合伙) 11572
• 代理人: 段宇

本發明涉及一種可檢測mircoRNA的納米Zn₂Ph₂Da探針的制備方法，包括如下步驟：步驟1，納米Zn₂Ph₂Da材料制備；步驟2，熒光標記核酸適體吸附納米Zn₂Ph₂Da。本發明的有益效果在于，首先，本發明納米Zn₂Ph₂Da探針的制備方法簡單，制備過程不需要有毒有機溶劑，不需要嚴格的合成條件；其次，該納米Zn₂Ph₂Da探針穩定性好，使用方便；此外，該納米Zn₂Ph₂Da探針具有良好的核酸適配體結合能力，對mircoRNA有良好的選擇性，其他生物分子及有機分子對其熒光信號無明顯影響；最后，本發明方法為共性檢測方法，適用于各種mircoRNA的選擇性識別和檢測。

技術領域

本發明屬于microRNA熒光檢測的技術領域，具體涉及一種檢測 mircoRNA的納米Zn₂Ph₂Da探針的制備方法。

背景技術

MicroRNA是一類約18～25個堿基的單鏈小分子RNA，可通過各種途徑參與生物體內發育、器官形成、造血過程、病毒防御、脂肪代謝等生理活動，其反常表達與癌癥的引發、腫瘤的生成、腫瘤治療的應激反應有關，是癌癥處理的重要標志物和治療靶分子。因此，實現對microRNA的高靈敏檢測具有重要的科學意義。

目前，檢測mircoRNA的方法大致分為Northern印跡法、微陣列芯片技術、RT-PCR技術、核酸雜交擴增檢測、納米檢測等。其中，基于納米材料的mircoRNA熒光檢測方法不僅操作簡單，而且具有高靈敏度、高選擇性的特點。這些納米材料(如金納米顆粒、石墨烯和二硫化鉬等)具有很好的熒光猝滅能力，并能吸附熒光標記的核酸適配體，當加入與該適配體完全匹配的目標mircoRNA后，雜交形成結構穩定的雙螺旋DNA結構，并從該納米材料表面脫離，體系的熒光信號恢復。根據體系熒光強度的變化，可實現對mircoRNA的定量檢測。

納米級金屬有機配位材料可作為一種新型的傳感材料，近年來在氣體存儲、催化和生物分子傳感領域展現出一定潛力。本發明以2,2’-二硫代水楊酸和1,10-菲啰啉為配體，制備了新型的含鋅離子的金屬有機配位材料(Zn₂Ph₂Da)。該材料通過π-π鍵相互作用形成穩定的晶體結構。在有機相中，通過超聲粉碎的方法，可以得到Zn₂Ph₂Da的納米級顆粒。納米 Zn₂Ph₂Da可吸附熒光分子標記的核酸適配體，通過熒光強度的變化，對目標mircoRNA進行高靈敏、高選擇性檢測。

發明內容

1.要解決的技術問題

為解決現有技術中存在的問題，本發明提供一種檢測mircoRNA的納米Zn₂Ph₂Da探針的制備方法，簡化制備步驟，提高檢測的穩定性，同時提高對mircoRNA的選擇性。

2.技術方案

為了實現上述目的，本發明的技術方案是：

一種檢測mircoRNA的納米Zn₂Ph₂Da探針的制備方法，包括如下步驟：

步驟1，納米Zn₂Ph₂Da材料制備；

步驟2，熒光標記核酸適體吸附納米Zn₂Ph₂Da。

優選的是，步驟1包括如下步驟：