[發明專利]一種檢測mircoRNA的納米探針的制備方法有效
| 申請號： | 201811016661.8 | 申請日： | 2018-09-03 |
| 公開（公告）號： | CN109097441B | 公開（公告）日： | 2021-07-06 |
| 發明（設計）人： | 王懷松;蘇彥龍;王丹丹;陳諾;趙雅萱;郝亞波;魏紀平 | 申請（專利權）人： | 中國藥科大學 |
| 主分類號： | C12Q1/6806 | 分類號： | C12Q1/6806 |
| 代理公司： | 北京卓特專利代理事務所(普通合伙) 11572 | 代理人： | 段宇 |
| 地址： | 211198 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 檢測 mircorna 納米 探針 制備 方法 | ||
1.一種檢測mircoRNA的納米Zn2Ph2Da探針的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：
步驟1，納米Zn2Ph2Da材料制備；
步驟2，熒光標記核酸適體吸附納米Zn2Ph2Da；
步驟1包括如下步驟：
步驟1.1，稱取ZnAc2·2H2O、配體2,2’-二硫代水楊酸和輔助配體1,10-菲啰啉加入10-100mL極性有機溶劑中；
步驟1.2，在步驟1.1的混合溶液中加入0.1-0.5mL氫氧化鈉或氫氧化鉀溶液，所述氫氧化鈉或氫氧化鉀溶液濃度為0.01-0.05g/mL，混合均勻；
步驟1.3，步驟1.2中的混合溶液轉移至反應釜的聚四氟乙烯內膽中，封裝反應釜，放入烘箱中，以150-220℃加熱，反應20-70h；
步驟1.4，將步驟1.3反應釜降溫至室溫，得到Zn2Ph2Da晶體；
步驟1.5，將步驟1.4中得到的Zn2Ph2Da晶體1-10mg，加入1-10mL無水乙醇中，利用細胞破碎儀超聲粉碎10-60min后，離心，得到納米Zn2Ph2Da；
步驟2包括如下步驟：
步驟2.1，將0.010-0.150mg納米Zn2Ph2Da分散于0.5-1.0mL濃度為0.01M的PBS中，pH7.4；
步驟2.2，加入0.5-10μL TAMRA標記濃度為10-50μM的核酸適配體，室溫下攪拌反應0.1-1h，在5000-12000rpm條件下離心，得到納米Zn2Ph2Da探針；
2,2’-二硫代水楊酸、1,10-菲啰啉和Zn離子的摩爾比例為1:2:2。
2.根據權利要求1所述的一種檢測mircoRNA的納米Zn2Ph2Da探針的制備方法，其特征在于：所述的Zn2Ph2Da晶體形貌為長方體。
3.根據權利要求2所述的一種檢測mircoRNA的納米Zn2Ph2Da探針的制備方法，其特征在于：ZnAc2·2H2O的摩爾數為0.05-0.50mmol。
4.根據權利要求3所述的一種檢測mircoRNA的納米Zn2Ph2Da探針的制備方法，其特征在于：配體2,2’-二硫代水楊酸的摩爾數0.05-0.60mmol。
5.根據權利要求4所述的一種檢測mircoRNA的納米Zn2Ph2Da探針的制備方法，其特征在于：輔助配體1,10-菲啰啉的摩爾數為0.05-0.60mmol。
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