[發(fā)明專利]一種提高玉鈴花組織培養(yǎng)容器苗效率的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201811004404.2
• 申請日: 2018-08-30
• 公開（公告）號: CN109329047B
• 公開（公告）日: 2021-06-04
• 發(fā)明（設計）人: 張凡;翟恒華;胡愛章;王傳永;馬海菊;周艷威;陳紅;陸小清
• 申請（專利權）人: 江蘇省中國科學院植物研究所;青島彩盛農業(yè)科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京知本村知識產權代理事務所(普通合伙) 11039
• 代理人: 劉江良

本發(fā)明公開一種提高玉玲花組織培養(yǎng)容器苗效率的方法，包括以下步驟：1）對優(yōu)選玉玲花種子進行濃硫酸處理，洗凈后置入萌發(fā)培養(yǎng)基中進行無菌培養(yǎng)，發(fā)芽后截取帶芽莖段作為外植體；2）將外植體接種到誘導培養(yǎng)基中培養(yǎng)；3）優(yōu)選帶不定芽的愈傷組織，截取后接種到誘導培養(yǎng)基中培養(yǎng)；4）優(yōu)選無根芽苗接種到生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)；5）待根長到4?5cm時，將組培苗先移栽至以蛭石基質的容器中，通過澆營養(yǎng)液進行過度培養(yǎng)，經過18?21d的環(huán)境適應性馴化后移至以泥炭土為基質的容器中。該方法通過改進無菌外植體獲取的途徑，改良組織培養(yǎng)基的配置方案，優(yōu)化組織培養(yǎng)幼苗的訓化方法，提高了組織培養(yǎng)容器苗的效率。

技術領域

本發(fā)明屬于植物種苗繁殖技術領域，具體涉及一種玉鈴花的組織培養(yǎng)快速繁育方法。

背景技術

玉鈴花(styrax abassia)，野茉莉科，野茉莉屬，小喬木或灌木。花朵芳香、樹資優(yōu)美，是一種優(yōu)良的園林綠化觀賞樹種。并且，玉鈴花花朵可提取芳香油；種子富含油脂可制作潤滑油等；木材致密可供制作器具等。目前市場對玉鈴花的需求量逐年增加，但苗木供應稀少。

玉鈴花種子外皮堅硬透水性差，內皮有一層致密保護膜包裹種胚，造成玉鈴花播種育苗周期長且發(fā)芽率低。扦插繁殖技術目前成活率較低，且前期需要營建大量的采穗用苗，增加生產成本同時延長了生產周期，難以滿足日益增大的市場需求量。王奎玲(玉鈴花的組織培養(yǎng)與快速繁殖，植物生理學通訊，2010,9(46),959-960)，李俊卿(嶗山野生玉鈴花引種與繁育研究，青島農業(yè)大學，2008，36-43)，陳甜甜(玉玲花高效快繁技術研究，時代農機，2017,6(44),109-110)等研究了玉鈴花的組織培養(yǎng)技術。

但在實際操作過程中，發(fā)現還存在以下問題：(1)從母樹上截取的外植體(帶芽莖段)表面消毒困難，通過升汞進行滅菌處理時，所用劑量和處理時間較難掌握，污染不易根除的同時易對外植體造成傷害，導致外植體褐化、死亡；(2)不定芽在MS培養(yǎng)基上較易褐化；(3)生根苗直接移栽至土壤中成活率較低；表現為幼苗從實驗室環(huán)境過渡到適應田間環(huán)境的過程中容易死亡，導致玉鈴花組織培養(yǎng)方法難以應用于生產。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于克服已有技術的不足而提供一種提高玉鈴花的組織培養(yǎng)效率和移栽馴化的方法，該方法通過改進無菌外植體獲取的途徑，改良組織培養(yǎng)基的配制方案，優(yōu)化組織培養(yǎng)幼苗的訓化方法，提高了組織培養(yǎng)容器苗的效率。因而，本發(fā)明提供一種提高玉鈴花組織培養(yǎng)容器苗效率的方法，可以提高玉鈴花組織快繁效率和移栽成活率，彌補了玉鈴花繁殖周期長、效率低的現狀，同時也緩解了市場對玉鈴花苗木需求的問題。

具體地，本發(fā)明提供一種提高玉鈴花組織培養(yǎng)容器苗效率的方法，其特征在于通過以下步驟進行：

1)消毒處理玉鈴花種子后置于種子萌發(fā)培養(yǎng)基中培養(yǎng)；

2)截取萌發(fā)的幼苗的帶芽莖段作為外植體，在誘導培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)；

3)截取帶愈傷組織的小不定芽，置入新的誘導培養(yǎng)基中繼續(xù)繼代培養(yǎng)；

4)將無根不定芽定植在生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)。

進一步包括下述步驟，5)將根長達4-5cm的幼苗移植錐形穴盤中，以蛭石為基質，每2-3天澆一次營養(yǎng)液，18-21d后移植到無紡布容器中以泥炭土和珍珠巖(優(yōu)選比例為2:1)為基質。

其中，步驟1)中所述的種子萌發(fā)培養(yǎng)基配制方法：以1/2MS培養(yǎng)基為基礎培養(yǎng)基，添加60-80mg/L的赤霉素，60-80mg/L的Vc，10－20g/L的蔗糖，400－600mg/L的活性炭和8－12g/L的瓊脂粉，并調節(jié)培養(yǎng)基pH值至5.6－6.0，優(yōu)選為5.8；其中，進一步優(yōu)選地，赤霉素濃度為60mg/L和Vc濃度在80mg/L，和/或15g/L的蔗糖，500mg/L的活性炭，10g/L的瓊脂粉。