[發(fā)明專利]一種端基為谷氨酸的呈鮮多肽表面分子印跡聚合物硅膠微球的制備方法及應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810994201.6
• 申請日: 2018-08-29
• 公開（公告）號: CN110871055B
• 公開（公告）日: 2023-05-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 胡小剛;何佩玲;羅曉燕;鄭雪屏
• 申請（專利權(quán)）人: 華南師范大學(xué)
• 主分類號: B01J20/26
• 分類號: B01J20/26;B01J20/28;B01J20/30;C08F292/00;C08F216/14;C08J9/26
• 代理公司: 廣州駿思知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44425
• 代理人: 吳靜芝

1.一種端基為谷氨酸的呈鮮多肽的表面分子印跡聚合物硅膠微球的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：

S1：采用稀鹽酸浸泡法，對硅膠微球表面進行除雜處理，得到活化硅膠微球；

S2：采用硅烷化試劑對活化硅膠微球進行表面硅烷化改性，得到硅烷化硅膠微球；

S3：采用RAFT試劑對硅烷化硅膠微球進行RAFT功能化處理，得到表面接枝雙硫酯鍵的RAFT功能化硅膠微球；

S4：將替代模板分子、金屬離子和功能單體于混合溶劑中充分混勻使替代模板分子、金屬離子和功能單體通過金屬螯合作用進行自組裝，然后加入交聯(lián)劑、引發(fā)劑以及RAFT功能化硅膠微球，通過RAFT聚合反應(yīng)，得到表面包覆有替代模板分子的分子印跡涂層微球；

S5：洗脫步驟S4所得硅膠微球，除去其表面包覆的替代模板分子后，使用乙二胺四乙酸二鈉洗脫液洗脫，干燥得到表面分子印跡聚合物硅膠微球；

其中，所述替代模板分子為L-谷氨酸，所述金屬離子為Cu²⁺，所述功能單體為1-(N，N-雙羧甲基)氨基-3-烯丙基甘油，

所述替代模板分子與功能單體的摩爾比為7:1～1:15；所述功能單體與金屬離子的摩爾比為9:1～1:12。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的端基為谷氨酸的呈鮮多肽的表面分子印跡聚合物硅膠微球的制備方法，其特征在于：所述交聯(lián)劑為N,N-亞甲基雙丙烯酰胺；所述引發(fā)劑為偶氮二異丁腈；所述引發(fā)劑的用量為交聯(lián)劑質(zhì)量的0.1％～5％。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的端基為谷氨酸的呈鮮多肽的表面分子印跡聚合物硅膠微球的制備方法，其特征在于：所述硅烷化試劑為4-氯甲基苯基三甲氧基硅烷；所述的硅烷化試劑與活化硅膠微球的摩爾比為8:1～1:12。

4.根據(jù)權(quán)利要求1～3任意一條所述的端基為谷氨酸的呈鮮多肽的表面分子印跡聚合物硅膠微球的制備方法，其特征在于：步驟S1中，將硅膠微球置于質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5％～20％的鹽酸中，超聲3～20min，并加熱至50～200℃保持12～48h；然后用去離子水洗滌抽濾直至中性，干燥，在50～200℃下活化12～48h，得到活化硅膠微球。

5.根據(jù)權(quán)利要求1～3任意一條所述的端基為谷氨酸的呈鮮多肽的表面分子印跡聚合物硅膠微球的制備方法，其特征在于：步驟S2中，將活化硅膠微球超聲分散于無水甲苯中，通入氮氣除氧，然后加入4-氯甲基苯基三甲氧基硅烷，于30～150℃反應(yīng)12～48h；用甲苯、乙醇分別洗滌后，干燥，得到硅烷化硅膠微球。

6.根據(jù)權(quán)利要求1～3任意一條所述的端基為谷氨酸的呈鮮多肽的表面分子印跡聚合物硅膠微球的制備方法，其特征在于：步驟S3中，對四氫呋喃進行干燥和通氮除氧預(yù)處理后，將苯基溴化鎂加入預(yù)處理的四氫呋喃中，然后逐滴加入CS₂，在20～80℃條件下反應(yīng)0.2～3h；之后加入硅烷化硅膠微球，超聲均勻分散，通入氮氣除氧3～30min，加熱至30～80℃反應(yīng)24～60h；反應(yīng)結(jié)束，依次用四氫呋喃、甲醇、丙酮多次洗滌后，干燥，得到RAFT功能化硅膠微球。

7.根據(jù)權(quán)利要求1～3任意一條所述的端基為谷氨酸的呈鮮多肽的表面分子印跡聚合物硅膠微球的制備方法，其特征在于：步驟S4中，將L-谷氨酸超聲溶解于混合溶劑中，加入1-(N，N-雙羧甲基)氨基-3-烯丙基甘油和Cu²⁺后，在10～80℃溫度下震蕩4～14h；之后向其中加入RAFT功能化硅膠微球、交聯(lián)劑，超聲分散后加入引發(fā)劑，振蕩超聲混勻后通入氮氣除氧，在50～60℃條件下反應(yīng)2～18h，得到包覆有替代模板分子的硅膠微球；其中，所述混合溶劑為乙醇和水的混合溶劑，乙醇和水的體積比為3:1～1:6。

8.根據(jù)權(quán)利要求要求7所述的端基為谷氨酸的呈鮮多肽的表面分子印跡聚合物硅膠微球的制備方法，其特征在于：步驟S5中，分別用去離子水、乙醇洗滌包覆有替代模板分子的硅膠微球，干燥；然后置于濃度為0.1～0.5mol/L乙二胺四乙酸二鈉洗脫液中連續(xù)多次洗脫，之后干燥得到表面分子印跡聚合物硅膠微球。

9.按照權(quán)利要求1～8任意一條所述的端基為谷氨酸的呈鮮多肽的表面分子印跡聚合物硅膠微球的制備方法所制得的端基為谷氨酸的呈鮮多肽的表面分子印跡聚合物硅膠微球在分離和檢測呈鮮多肽中的應(yīng)用。