[發明專利]一種鳥苷四磷酸的超高效液相色譜檢測方法在審
| 申請號： | 201810994060.8 | 申請日： | 2018-08-29 |
| 公開（公告）號： | CN109932439A | 公開（公告）日： | 2019-06-25 |
| 發明（設計）人： | 羅來鑫;白凱紅;蔣娜;李健強;曹永松 | 申請（專利權）人： | 中國農業大學 |
| 主分類號： | G01N30/02 | 分類號： | G01N30/02 |
| 代理公司： | 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246 | 代理人： | 陳波 |
| 地址： | 100193 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 流動相 超高效液相色譜 磷酸 鳥苷 檢測 反相C18色譜柱 化學分析技術 色譜條件 梯度洗脫 洗脫條件 有效檢測 緩沖液 進樣量 色譜柱 基線 甲醇 乙腈 節約 | ||
1.一種鳥苷四磷酸的超高效液相色譜檢測方法，其特征在于，包括如下步驟，采用如下色譜條件：
色譜柱：反相C18色譜柱；
流動相：包括流動相A與流動相B；
所述流動相A為甲醇或乙腈，所述流動相B為KH2PO4溶液或K2HPO4-KH2PO4緩沖液；
洗脫條件為：流動相A：流動相B＝3-10：90-97。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述KH2PO4溶液或K2HPO4-KH2PO4緩沖液含有正四丁基溴化銨。
3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述KH2PO4溶液的濃度為0.1-0.2mol/L；所述K2HPO4-KH2PO4緩沖液的濃度為0.025-0.15mol/L。
4.根據權利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述正四丁基溴化銨的濃度為2.5～12mmol/L。
5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述正四丁基溴化銨的濃度為5～10mmol/L。
6.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，色譜條件還包括：檢測器為DAD檢測器，檢測波長為250～260nm。
7.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，色譜條件還包括：柱溫控制為25～37℃。
8.根據權利要求1或2所述的方法，其特征在于，色譜條件還包括：進樣量為5～20μL，流速為0.1～0.4mL/min。
9.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述色譜柱柱長為150mm。
10.根據權利要求1-9任一項所述的方法，其特征在于，包括步驟如下：
(1)制備一系列濃度梯度的鳥苷四磷酸標準品，按色譜條件，進行超高效液相色譜檢測，根據不同濃度標準品的色譜圖數據，繪制峰面積與濃度的相關標準曲線；
(2)制備檢測樣品，超高效液相色譜檢測，得到峰面積，根據峰面積，利用標準曲線，計算得到檢測樣品的濃度。
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