[發(fā)明專利]煙草eIF4E-1突變位點(diǎn)特異性共顯性分子標(biāo)記及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810989309.6
• 申請(qǐng)日: 2018-08-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108866234B
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-09-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 林世鋒;王仁剛;余婧;任學(xué)良;張潔;余世洲
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 貴州省煙草科學(xué)研究院
• 主分類號(hào): C12Q1/6895
• 分類號(hào): C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 貴陽(yáng)中新專利商標(biāo)事務(wù)所 52100
• 代理人: 張行超

1.一種煙草eIF4E-1突變位點(diǎn)特異性共顯性分子標(biāo)記，其特征在于：與野生型位點(diǎn)檢測(cè)相關(guān)的標(biāo)記命名為ASM-W，片段大小543bp，如SEQ ID No.1所示；對(duì)應(yīng)的堿基插入突變位點(diǎn)檢測(cè)相關(guān)的標(biāo)記命名為ASM-m，片段大小543bp，如SEQ ID No.2所示。

2.一種用于鑒別權(quán)利要求1中突變位點(diǎn)特異性共顯性分子標(biāo)記的引物組合，其特征在于：該引物組合包括以下兩種組合：

正向引物FW和反向引物RWm的組合，用于擴(kuò)增分子標(biāo)記ASM-W；

正向引物Fm和反向引物RWm的組合，用于擴(kuò)增分子標(biāo)記ASM-m；

其中，正向引物FW的序列如下：

5'-CACTTTTTCCACTGTCGAAGATTTATG-3'；

正向引物Fm的序列如下：

5'-ACTTTTTCCACTGTCGAAGATTTTATG-3'；

反向引物RWm的序列如下：

5'-AAAATTTTTAAAACAAGATAGACATTTGTGTG-3'。

3.權(quán)利要求2所述的引物組合在鑒別煙草eIF4E-1基因位點(diǎn)的基因型中的應(yīng)用。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于：具體應(yīng)用方式為：利用引物FW和RWm的組合以及引物Fm和RWm的組合，對(duì)待測(cè)個(gè)體的基因組DNA進(jìn)行兩次PCR擴(kuò)增，檢測(cè)擴(kuò)增片段的有無(wú)，如果引物Fm和RWm的組合擴(kuò)增出543bp特異擴(kuò)增條帶，而引物FW和RWm的組合擴(kuò)不出則為純合突變型；如果引物FW和RWm的組合擴(kuò)增出543bp特異擴(kuò)增條帶，而引物Fm和RWm的組合擴(kuò)不出則為野生型；如果引物FW和RWm的組合以及引物Fm和RWm的組合均能擴(kuò)增出543bp特異擴(kuò)增條帶，則為雜合突變型。