[發(fā)明專利]一種檢測牛諾如病毒和牛冠狀病毒的引物組和雙重RT-PCR方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810985249.0 | 申請日： | 2018-08-28 |
| 公開（公告）號： | CN108913815B | 公開（公告）日： | 2021-12-10 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 師志海;蘭亞莉;王文佳;王璟;施巧婷;徐照學(xué) | 申請（專利權(quán)）人： | 河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 鄭州明華專利代理事務(wù)所(普通合伙) 41162 | 代理人： | 王明朗 |
| 地址： | 450000 河*** | 國省代碼： | 河南;41 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 檢測 牛諾如 病毒 冠狀病毒 引物 雙重 rt pcr 方法 | ||
1.一種檢測牛諾如病毒和牛冠狀病毒的雙重RT-PCR方法，其特征在于，包括以下步驟：
（1）引物合成：合成引物組，所述引物組由用于檢測牛諾如病毒的引物和用于檢測牛冠狀病毒的引物組成；
（2）待測樣品RNA提取、反轉(zhuǎn)錄：提取待測樣品中的RNA，以提取的RNA為模板反轉(zhuǎn)錄得到其cDNA；
（3）PCR擴增：以步驟（2）制得的cDNA為模板，采用步驟（1）合成的引物組進行PCR擴增反應(yīng)；所述PCR擴增反應(yīng)的反應(yīng)體系為：Premix Taq10μL，10pmol/μL的上游引物P1、下游引物P2、上游引物P3、下游引物P4各0.5μL，cDNA模板1 .0μL，無菌雙蒸水補至20μL；所述PCR擴增反應(yīng)條件為：94℃預(yù)變性5min；94℃變性1min，54℃退火1min，72℃延伸2min，共35個循環(huán)；72℃延伸7 min；
（4）分析PCR擴增產(chǎn)物；
其中，所述用于檢測牛諾如病毒的引物的核苷酸序列為： 上游引物P1：5ˊ-GGCAAACCACGCAAACAAC-3ˊ（SEQ ID NO .1）， 下游引物P2：5ˊ-CTTCCGAAAGGGCACAGA-3ˊ（SEQID NO .2）； 所述用于檢測牛冠狀病毒的引物的核苷酸序列為： 上游引物P3：5ˊ-TAGTAGTTCAGAGGTGGAT-3ˊ（SEQ ID NO .3）， 下游引物P4：5ˊ-ACAAGTCTTCAGTAGGGT-3ˊ（SEQID NO .4）；
所述雙重RT-PCR方法不以疾病檢測和/或治療為目的。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，未經(jīng)河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201810985249.0/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
- 鑒定GGⅠ組諾如病毒和GGⅡ組諾如病毒的方法及專用試劑盒
- 一種檢測水產(chǎn)品中諾如病毒的實時熒光PCR方法
- 一種牛肺依諾肝素鈉及其制備方法與應(yīng)用
- 一種牛腸粘膜依諾肝素鈉及其制備方法與應(yīng)用
- 一種GII型諾如病毒核酸檢測標準物質(zhì)及其制備方法和應(yīng)用
- 一種女士用保肝美顏的牛樟芝保健酒的制備方法
- 一種檢測牛諾如病毒和牛冠狀病毒的引物組和雙重RT-PCR方法
- 基于免疫磁珠和熒光量子點的納米生物傳感器快速檢測肉雞中恩諾沙星的方法
- 一種諾如病毒GII型標準品質(zhì)粒構(gòu)建引物及其應(yīng)用
- 一種牛大力-諾麗復(fù)合酵素及其制備方法與在制備面膜中的應(yīng)用
