[發(fā)明專利]一種基于納米金信號放大檢測天蠶素B的方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810982718.3
• 申請日: 2018-08-27
• 公開（公告）號: CN109060666A
• 公開（公告）日: 2018-12-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 蘇秀霞;徐佳;張婧;張海寧;張姣;霍文靜;胡金龍;晏春苗
• 申請（專利權(quán)）人: 陜西科技大學(xué)
• 主分類號: G01N21/17
• 分類號: G01N21/17;G01N21/25;G01N33/68
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 61200
• 代理人: 徐文權(quán)

1.一種基于納米金信號放大檢測天蠶素B的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)將玻片切割為上玻片及下玻片，再將上玻片及下玻片用Piranha溶液于80℃-100℃的溫度下浸泡，然后沖洗后吹干；

2)將上玻片浸入DMOAP水溶液中進行浸泡，再沖洗后吹干；同時將下玻片放置于50℃-70℃的醋酸-醋酸鈉溶液中浸泡，然后沖洗后吹干，其中，醋酸-醋酸鈉溶液中TEA與DMOAP體積比為3:1；

3)將天蠶素B抗體溶液滴加到下玻片表面，并放置在37℃-50℃的溫度下溫育2.5-4h，再沖洗后吹干；

4)將待檢測的納米金復(fù)合的天蠶素B溶液滴加到下玻片上，再放置于37℃-50℃的溫度下溫育1.5-3h，然后沖洗后吹干；

5)將上玻片放置于下玻片上，其中，上玻片與下玻片之間用Mylar聚酯片隔開，Mylar聚酯片的中部開設(shè)有凸型空腔，該凸型空腔的一側(cè)開口，再將液晶5CB加熱使液晶5CB呈各向同性的液態(tài)，然后將液晶5CB從該開口處注入到所述凸型空腔內(nèi)，使得液晶5CB注滿整個凸型空腔，再冷卻至室溫，得液晶池，然后利用偏光顯微鏡觀察液晶池光學(xué)信號的顏色及亮度，以實現(xiàn)對天蠶素B的檢測。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于納米金信號放大檢測天蠶素B的方法，其特征在于，步驟1)中分別通過乙醇及去離子水進行清洗，然后用N₂吹干；

步驟2)中上玻片用超純水進行沖洗，然后用N₂吹干；下玻片用超純水進行沖洗，然后用N₂吹干；

步驟3)中分別用PBS緩沖液及超純水進行沖洗，然后用N₂吹干；

步驟4)中分別用PBS緩沖液及超純水進行沖洗，然后用N₂吹干。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于納米金信號放大檢測天蠶素B的方法，其特征在于，將上玻片及下玻片用Piranha溶液于80℃-100℃的溫度下浸泡，使上玻片及下玻片表面產(chǎn)生羥基。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于納米金信號放大檢測天蠶素B的方法，其特征在于，步驟2)中DMOAP水溶液的體積分數(shù)為0.2-0.3％，浸泡時間為30min-50min。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于納米金信號放大檢測天蠶素B的方法，其特征在于，步驟3)中，將天蠶素B抗體溶液滴加到下玻片表面，再用洗耳球吹開，然后放置于37℃-50℃的溫度下溫育2.5-4h。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于納米金信號放大檢測天蠶素B的方法，其特征在于，步驟4)中，將待檢測的納米金復(fù)合的天蠶素B溶液滴加到下玻片上，再用洗耳球吹開，然后放置于37℃-50℃的溫度下溫育1.5-3h。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于納米金信號放大檢測天蠶素B的方法，其特征在于，步驟5)中將液晶5CB加熱至40℃-50℃，使液晶5CB呈各向同性的液態(tài)。